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阅读:83发布时间:2014-01-17
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兔雷帕霉素靶蛋白(mTOR)Elisa试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔雷帕霉素靶蛋白(mTOR)水平。用纯化的兔雷
帕霉素靶蛋白(mTOR)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入雷帕
霉素靶蛋白(mTOR),再与 HRP 标记的雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抗体结合,形成抗体-抗原-
酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,
并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的雷帕霉素靶蛋白(mTOR)呈正相
关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中兔雷帕霉素
靶蛋白(mTOR)蛋白浓度。标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性
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兔雷帕霉素靶蛋白(mTOR)Elisa试剂盒计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
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