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阅读:72发布时间:2013-12-19
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牛口蹄疫病毒(FMDV)Elisa试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10 孔,在*、第二孔中分别加标准品 100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液 50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl弃掉,再各取 50μl 分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取 50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50μl,混匀后从第九第十孔中各取 50μl 弃掉。(稀释后各孔加样量都为 50μl,浓度分别为(300 ng/L,200ng/L ,100ng/L,50 ng/L,25ng/L)。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用
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5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
牛口蹄疫病毒(FMDV)Elisa试剂盒检测范围:
20ng/L -400 ng/L
规格:
96 人份/盒
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
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