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阅读:82发布时间:2013-12-03
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小鼠衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)Elisa试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)水平。用
纯化的小鼠衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗
的微孔中依次加入衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF),再与 HRP 标记的衣原体蛋白酶样活性
因子(CPAF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。
TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样
品中的衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD
值),通过标准曲线计算样品中小鼠衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)浓度。标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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小鼠衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)Elisa试剂盒计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
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