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上海纪宁试剂有限公司
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阅读:266发布时间:2015-10-27
到了目前为止,我们能够常见到的几种ELISA方法有测定抗体的间接法,测定抗原的双抗体夹心法和测定抗原的竞争法等。我公司所供应的试剂产品拥有的全面的技术服务让客户用的放心,我司从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导。
执行ELSIA实验的目的与依据
以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原分子上,形成酶标抗体/酶标抗原,称为酶结合物。该酶结合物的酶在免疫反 应后,作用于底物使之呈色,根据颜色的有无和深浅,定位或定量抗原/抗体。ELISA 法是免疫酶技术的一种,其特点是利用聚苯乙烯微量反应板(或球)吸附抗原/抗体,使之固相化,免疫反应和酶促反应都在其中进行。在每次反应后都要反复洗 涤,这既保证了反应的定量关系,也避免了末反应的游离抗体/抗原的分离步骤。在ELISA 法中。酶促反应只进行一次,而 抗原、抗体的免疫反应可进行一次或数次,即可用二抗(抗抗体)、三抗再次进行免疫反应。
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每种试剂都有其反应模式,其中温度和温育时间控制是重要因素。因孵育温度高,反应时间长,会造成整板本底高,阳性率高。
·精密度:一般指其批内CV,其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围。
·安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
·经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本而市场价格比较合理。
常因样品采集、贮存、处理不当造成如样品溶血,被细菌污染,标本凝集不全等。溶血标本,红细胞溶解破裂,释放出血红素形成,而血红素中的铁卟啉是过氧化物酶的类似物,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
在血标本采集处理时应小心,在冰箱中保存不易过久。
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