由评价监督者对考核血清盘重新编密码，由2名操作熟练的专业检验人员对编码血清盘用上述2种马ELISA试剂盒进行盲法检测，操作严格按试剂盒，筛检结果由全自动酶标仪自动打印OD值及阴、阳性结果。为考核试剂盒的可靠性，由2名以上专业检验人员在条件*相同的情况下，对考核血清盘40份血清进行第二次盲法筛检，第二次筛检前重新编密码，结果判读后再打开密码，核对结果。
1.2.3 金标准的确定
卫生部临床检验中心梅毒抗体血清盘已知阳性与阴性为金标准。
1.2.4 其实性评价
将40份血清盘标本分为梅毒抗体阳性与阴性组，再将筛检试剂盒的筛检结果分为梅毒抗体阳性与阴性组，分组数据汇入筛检与诊断试验评价四格表，用分式，分别计算出真实性评价的8个指标，即灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率、阳性预告值、阴性预告值、马ELISA试剂盒准确度及约登指数。
1.2.5 可靠性评价
将40份血清盘样本*次与第二次筛检结果，分别汇入四格表，分别计算出各试剂盒重复试验的符合率与卡帕值，卡帕值的判定标准按Fleiss提出的3级划分标准评价，即0.75～1.00为符合很好，0.4～0.74为一般符合，0.01～0.39为缺乏符合。
1.2.6 Cut-off值评价方法
为了评价两种ELISA试剂盒截断点或临界值的合理性，将考核血清盘中18份阴性血清及随机抽取的西安市无偿献血者梅毒抗体阴性血清100人份测量出的OD值编制频数分布表，按筛检试验正常值范围确定方法，分别用统计学界限的正态分布法及百分位数法计算出每种试剂盒的Cut-off值，马ELISA试剂盒并与按试剂盒说明书规定计算出的Cut-off值比较，结合阴性、阳性OD值频数分布特点，分析评价其合理性。
