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上海纪宁酶联科技有限公司
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人抗利尿激素/血管加压素/*加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人抗利尿激素/血管加压素/*加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人抗利尿激素/血管加压素/*加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
63634 Anti-CK3/FITC 荧光素标记细胞角蛋白3抗体IgG 0.2ml
63635 Anti-CK4/FITC 荧光素标记细胞角蛋白4抗体IgG 0.2ml
63636 Anti-CK5/FITC 荧光素标记细胞角蛋白5抗体IgG 0.2ml
63637 Anti-PCNA(phosphos Dyr211)/FITC 荧光素标记兔抗人、小鼠、大鼠、牛、兔、羊、鸡磷酸化增殖细胞核抗原抗体IgG 0.2ml
63638 Anti-CK5/6 /FITC 荧光素标记细胞角蛋白5/6抗体IgG 0.2ml
63639 Anti-CK7/FITC 荧光素标记细胞角蛋白7抗体IgG 0.2ml
63640 Anti-CK7/FITC 荧光素标记抗细胞角蛋白7抗体(大、小鼠)IgG 0.2ml
63641 Anti-CK10/FITC 荧光素标记细胞角蛋白10抗体IgG 0.2ml
63642 Anti-CK10/RBITC 红色荧光素罗丹明标记细胞角蛋白10抗体IgG 0.2ml
63643 Anti-CK14/FITC 荧光素标记兔抗细胞角蛋白14抗体IgG 0.2ml
63644 Anti-CK15/FITC 荧光素标记细胞角蛋白15抗体IgG 0.2ml
63645 Anti-CK16/FITC 荧光素标记细胞角蛋白16抗体IgG 0.2ml
63646 Anti-CK17/FITC 荧光素标记细胞角蛋白17抗体IgG 0.2ml
63647 Anti-Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) /FITC 荧光素标记磷酸化细胞角蛋白17抗体IgG 0.2ml
63648 Anti-CK18/FITC 荧光素标记细胞角蛋白18抗体IgG 0.2ml
63649 Anti-CK18(C-term) /FITC 荧光素标记细胞角蛋白18抗体(C端)IgG 0.2ml
63650 Anti-CK18/FITC 荧光素标记细胞角蛋白18抗体IgG 0.2ml
63651 Anti-CK19/FITC 荧光素标记细胞角蛋白19抗体IgG 0.2ml
63652 Anti-CK19/Gold 胶体金离子标记细胞角蛋白19抗体IgG 0.2ml
63653 Anti-CK19/FITC 荧光素标记细胞角蛋白19抗体IgG 0.2ml
63654 Anti-CK19/RBITC 红色荧光素罗丹明标记细胞角蛋白19抗体IgG 0.2ml
63655 Anti-CK20/FITC 荧光素标记细胞角蛋白20抗体IgG 0.2ml
63656 Anti-CK34 BetaE12/FITC 荧光素标记高分子量角蛋白CK34βE12抗体IgG 0.2ml
63657 Anti-CK-HMW/FITC 荧光素标记高分子量细胞角蛋白抗体IgG 0.2ml
63658 Anti-CKMT2/FITC 荧光素标记肌酸磷酸激酶2抗体IgG 0.2ml
63659 Anti-CKIP-1/FITC 荧光素标记酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗体IgG 0.2ml
63660 Anti-CKLFSF2(human)/FITC 荧光素标记人类新细胞因子/趋化素样因子超家族成员2抗体IgG 0.2ml
63661 Anti-CLCA4/FITC 荧光素标记钙激活氯离子通道4抗体IgG 0.2ml
63662 Anti-CLDN1/FITC 荧光素标记紧密连接蛋白1抗体(C端)IgG 0.2ml
63663 Anti-CLDN1/FITC 荧光素标记紧密连接蛋白1抗体IgG 0.2ml
63664 Anti-ocludin-5/FITC 荧光素标记紧密连接蛋白-5抗体IgG 0.2ml
63665 Anti-CLDN3/Claudin 3/FITC 荧光素标记紧密连接蛋白3抗体IgG 0.2ml
63666 Anti-CLDN4/Claudin 4/FITC 荧光素标记紧密连接蛋白4抗体IgG 0.2ml
63667 Anti-CLDN5/FITC 荧光素标记紧密连接蛋白5抗体IgG 0.2ml
63668 Anti-CLEC-1/CLEC1A/FITC 荧光素标记C型凝集素结构域家族1成员A抗体IgG 0.2ml
63669 Anti-CLEC-2/CLEC1B/FITC 荧光素标记C型凝集素结构域家族1成员B抗体IgG 0.2ml
63670 Anti-CLEC2D/OCIL/FITC 荧光素标记CLEC2D蛋白抗体IgG 0.2ml
63671 Anti-CLEC5A/MDL1/FITC 荧光素标记C型凝集素结构域家族5成员A抗体IgG 0.2ml
63672 Anti-CLEC13D/MMR1/CD206/FITC 荧光素标记巨噬细胞甘露糖受体抗体IgG 0.2ml
63673 Anti-Clostridium perfringens type D/FITC 荧光素标记兔抗D型产气荚膜梭菌抗体IgG 0.2ml
63674 Anti-cofilin/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠丝切蛋白抗体IgG 0.2ml
63675 Anti-Phospho-Cofilin (Ser3) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化丝切蛋白抗体IgG 0.2ml
63676 Anti-Cortactin/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠皮层肌动蛋白抗体IgG 0.2ml
63677 Anti-Cortactin (phospho Tyr466) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化皮层肌动蛋白抗体IgG 0.2ml
63678 Anti-COLEC12/CL-P1/FITC 荧光素标记凝集胎盘蛋白1抗体IgG 0.2ml
63679 Anti-Glycodelin A/PP14/FITC 荧光素标记胎盘蛋白14抗体IgG 0.2ml
63680 Anti-Clusterin- Alpha/ Beta /FITC 荧光素标记凝聚素α/β抗体IgG 0.2ml
63681 Anti-C-Myc/HRP (MYC/MTLC) 辣根过氧化物酶标记致癌基因C-Myc抗体IgG 0.2ml
63682 Anti-C-Mer/MERTK /FITC 荧光素标记c-mer原癌基因*激酶抗体IgG 0.2ml
63683 Anti-C-Met/HGFR /FITC 荧光素标记肝细胞生长因子受体(原癌基因蛋白)抗体IgG 0.2ml
63684 Anti-C-Met/HGFR/HRP/*加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒 辣根过氧化物酶标记肝细胞生长因子受体(原癌基因蛋白)抗体IgG 0.2ml
63685 Anti-SMMHC/MYH11/FITC 荧光素标记平滑肌肌球蛋白重链抗体IgG 0.2ml
63686 Anti-SM-MHC/FITC 荧光素标记心肌肌凝蛋白抗体IgG 0.2ml
63687 Anti-CMKLR1/CHEMR23/FITC 荧光素标记趋化样因子受体1抗体IgG 0.2ml
63688 Anti-C-Myc/MYC/MTLC /FITC 荧光素标记C-Myc致癌基因抗体IgG 0.2ml
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5/*加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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