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上海纪宁酶联科技有限公司
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人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
63017 Anti-CHRNA2/FITC 荧光素标记烟碱型乙酰*受体A2(神经型)抗体IgG 0.2ml
63018 Anti- Beta-Actin/Gold 金标记β-肌动蛋白抗体IgG 0.2ml
63019 Anti-Acinus L/S/FITC 荧光素标记腺泡Acinus L/S抗体IgG 0.2ml
63020 Anti-Acinus(phospho S1180)/FITC 荧光素标记腺泡磷酸化Acinus抗体IgG 0.2ml
63021 Anti-Ack1/FITC 荧光素标记Ack1抗体IgG 0.2ml
63022 Anti-Ack1(Phospho-Tyr284) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化Ack1抗体IgG 0.2ml
63023 Anti-Phospho-Ack1(Tyr857/858) /FITC 荧光素标记兔抗人、小鼠磷酸化Ack1抗体IgG 0.2ml
63024 Anti-Phospho-Ack1(Tyr326) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化Ack1抗体IgG 0.2ml
63025 Anti-ACTH 1-39/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠ACTH抗体IgG 0.2ml
63026 Anti-ACTH(7-23)/FITC 荧光素标记促肾上腺皮质激素(7-23)抗体IgG 0.2ml
63027 ACTH(18-39)/FITC 荧光素标记ACTH(18-39)抗体IgG 0.2ml
63028 Anti-Actin Alpha /Alpha-SMA/FITC 荧光素标记Actin α 蛋白抗体IgG 0.2ml
63029 Anti-Actin Alpha / Alpha-SMA/RBITC 红色荧光素标记肌动蛋白α抗体IgG 0.2ml
63030 Anti- Beta-Actin/FITC 荧光素标记β-肌动蛋白抗体IgG 0.2ml
63031 Anti-F-Actin/FITC 荧光素标记抗F-肌动蛋白抗体 0.2ml
63032 Anti- Alpha-ACTN4/FITC 荧光素标记抗α-辅肌动蛋白4抗体IgG 0.2ml
63033 Anti-ADAM-TS1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠整合素样金属蛋白酶与*1型抗体IgG 0.2ml
63034 Anti-ADAM10/MADM/CD156c/FITC 荧光素标记去整合素样金属蛋白酶10抗体IgG 0.2ml
63035 Anti-ADAM-TS7/FITC 荧光素标记整合素样金属蛋白酶与*1型-7抗体IgG 0.2ml
63036 Anti-14-3-3 family protein/FITC 荧光素标记植物14-3-3蛋白抗体IgG 0.2ml
63037 Anti-ADAM-TS7/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠整合素样金属蛋白酶与*1型-7(N端)抗体IgG 0.2ml
63038 Anti-ADAM-TS12/FITC 荧光素标记整合素样金属蛋白酶与*1型-12抗体IgG 0.2ml
63039 Anti-ACV-A/FITC 荧光素标记活化素A抗体IgG 0.2ml
63040 Anti-Adducin protein/FITC 荧光素标记内收蛋白抗体IgG 0.2ml
63041 Anti-Adenosine A2A-R/FITC 荧光素标记腺苷A2A受体抗体IgG 0.2ml
63042 Anti-ADFP/ADRP/adipophilin/FITC 荧光素标记脂肪组织分化相关蛋白抗体IgG 0.2ml
63043 Anti-DRP3/FITC 荧光素标记Dystrobrevin α蛋白抗体IgG 0.2ml
63044 Anti-ADH/AVP/FITC 荧光素标记抗利尿激素/血管升压素抗体IgG 0.2ml
63045 Anti-Adipo R1/FITC 荧光素标记脂联素受体-1蛋白抗体IgG 0.2ml
63046 Anti-Adipo R2 /FITC 荧光素标记脂联素受体-2抗体IgG 0.2ml
63047 Anti-Adiponectin/FITC 荧光素标记脂联素抗体IgG 0.2ml
63048 Anti-ADM/FITC 荧光素标记肾上腺髓质素抗体IgG 0.2ml
63049 Anti-ADM R/FITC 荧光素标记肾上腺髓质素受体抗体IgG 0.2ml
63050 Anti-ADMR/FITC 荧光素标记肾上腺髓质素受体抗体IgG 0.2ml
63051 Anti-ADNP/FITC 荧光素标记活性依赖的神经保护肽抗体IgG 0.2ml
63052 Anti-ADO/FITC 荧光素标记2-氨基乙硫醇双加氧酶抗体IgG 0.2ml
63053 Anti-ADORA3/A3AR /FITC 荧光素标记腺苷受体A3抗体IgG 0.2ml
63054 Anti-ADRA2/FITC 荧光素标记alpha-2肾上腺素能受体抗体IgG 0.2ml
63055 Anti-ADRB1/FITC 荧光素标记肾上腺素能受体β1抗体IgG 0.2ml
63056 Anti-ADRB2/FITC 荧光素标记肾上腺素能受体β2抗体IgG 0.2ml
63057 Anti-ADRB2(phospho Ser346)/FITC 荧光素标记磷酸化肾上腺素能受体β2抗体IgG 0.2ml
63058 Anti-ADRB2/RBITC 罗丹明标记肾上腺素能受体β2抗体IgG 0.2ml
63059 Anti-ADRB3/ Beta3-AR /RBITC 罗丹明标记肾上腺素能受体β3抗体IgG 0.2ml
63060 Anti-ADRB3/ Beta3-AR /FITC 荧光素标记肾上腺素能受体β3抗体IgG 0.2ml
63061 Anti-CD8/RBITC 罗丹明标记CD8抗体IgG 0.2ml
63062 Anti-AD7C/FITC 荧光素标记神经丝蛋白抗体IgG 0.2ml
63063 Anti-AD7C-NTP/NTP/AF /FITC 荧光素标记神经丝蛋白抗体(人)IgG 0.2ml
63064 Anti-AE3/FITC 荧光素标记阴离子交换蛋白3抗体IgG 0.2ml
63065 Anti-AEV/FITC 荧光素标记禽脑脊髓炎病毒抗体IgG 0.2ml
63066 Anti-AEBP1/FITC 荧光素标记脂肪细胞增强结合蛋白1抗体IgG 0.2ml
63067 Anti-AF6/Afadin/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠丝状肌动蛋白结合蛋白抗体IgG 0.2ml
63068 Anti-phospho-Afadin(Ser1718) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体IgG 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒0.2ml
63069 Anti-AGER/RAGE /FITC 荧光素标记晚期糖基化终末产物特异性受体抗体IgG 0.2ml
63070 Anti-AGEs/FITC 荧光素标记晚期糖基化终末产物抗体IgG 0.2ml
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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