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上海纪宁酶联科技有限公司
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人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
62229 Anti-Phospho-PKC gamma (Thr514) 磷酸化蛋白激酶C亚型G抗体 0.1ml
62230 Anti-Phospho-PKC gamma (Thr674) 磷酸化蛋白激酶C亚型G抗体 0.1ml
62231 Anti-PKC delta 蛋白激酶C亚性D型抗体 0.2ml
62232 Anti-phospho-PKC delta (Tyr52) 磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体 0.1ml
62233 Anti-phospho-PKC delta (Thr505) 磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体 0.1ml
62234 Anti-phospho-PKC delta (Tyr311) 磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体 0.1ml
62235 Anti-PLAU/uPA *型纤溶酶原激活因子抗体 0.2ml
62236 Anti-PLAUR *型纤溶酶原激活因子受体抗体 0.1ml
62237 Anti-PLG 纤维蛋白溶酶原抗体 0.2ml
62238 Anti-Plexin A1 神经丛蛋白A1抗体 0.2ml
62239 Anti-Plexin A2 神经丛蛋白A2抗体 0.1ml
62240 Anti-Plexin B1 神经丛蛋白B1抗体 0.2ml
62241 Anti-Plectin 网蛋白抗体 0.2ml
62242 Anti-PLGF/PIGF (human) 胎盘生长相关抗体(人) 0.1ml
62243 Anti-PLGF/PIGF (mouse, rat, pig) 胎盘生长因子抗体(小鼠、大鼠、猪) 0.2ml
62244 Anti-PLGF 胎盘生长因子抗体 0.2ml
62245 Anti-PLK1/STPK13 */*蛋白激酶Plk1抗体 0.2ml
62246 Anti-Phospho-PLK1 (Thr210) 磷酸化丝/*蛋白激酶Plk1抗体 0.1ml
62247 Anti-Phospho-PLK1 (Ser137) 磷酸化丝/*蛋白激酶Plk1抗体 0.1ml
62248 Anti-PMP22 外周髓鞘蛋白-22抗体 0.2ml
62249 Anti-PMS2 肿瘤错配修复基因PMS2抗体 0.1ml
62250 Anti-PNAT/NAT2 N-乙酰基转移酶2抗体 0.2ml
62251 Anti-PNK1/PNKP 多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗体 0.2ml
62252 Anti-Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) 磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗体 0.1ml
62253 Anti-Podoplanin/gp36 平足蛋白抗体 0.2ml
62254 Anti-Pokemon 扑克蒙蛋白抗体 0.1ml
62255 Anti-Polycystin 1 多囊肾蛋白1抗体 0.2ml
62256 Anti-Polycystin 2 多囊肾蛋白2抗体 0.2ml
62257 Anti-PP-1B 蛋白磷酸酯酶-1B抗体 0.1ml
62258 Anti-PP2A alpha 蛋白质磷酸酶-2A抗体 0.2ml
62259 Anti-PP2A alpha 蛋白质磷酸酶-2A抗体 0.1ml
62260 Anti-PP2Ac 磷酸酯酶-2Ac抗体 0.1ml
62261 Anti-PPAR-delta/beta D型-过氧化酶活化增生受体抗体 0.2ml
62262 Anti-PPAR alpha α型-过氧化酶活化增生受体抗体 0.1ml
62263 Anti-PPAR Gamma 过氧化酶活化增生受体γ抗体 0.1ml
62264 Anti-Phospho-PPAR Gamma (ser112) 磷酸化过氧化酶活化增生受体γ抗体 0.1ml
62265 Anti-PPIG 亲环蛋白(亲环素)PPIG抗体 0.2ml
62266 Anti-Phospho-PPIG (Ser376) 磷酸化亲环蛋白(亲环素)PPIG抗体 0.2ml
62267 Anti-PKB/Akt1 蛋白激酶B 0.1ml
62268 Anti-phospho-AKT/PKB (Ser473) 磷酸化蛋白激酶B抗体 0.1ml
62269 Anti-phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗体 0.1ml
62270 Anti-phospho-Akt (Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗体 0.1ml
62271 Anti-Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 磷酸化组蛋白去乙酰化酶4、5、7抗体 0.1ml
62272 Anti-Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) 磷酸化组蛋白去乙酰化酶4、5、7抗体 0.1ml
62273 Anti-PKN2 蛋白激酶N2抗体 0.1ml
62274 Anti-RKIP Raf激酶抑制蛋白抗体 0.1ml
62275 Anti-PKR 蛋白激酶R抗体 0.2ml
62276 Anti-Phospho-PKR (Thr446) 磷酸化蛋白激酶R抗体 0.1ml
62277 Anti-Phospho-PKR (Thr451) 磷酸化蛋白激酶R抗体 0.1ml
62278 Anti-Phospho-PKR (Thr446/451) 磷酸化蛋白激酶R抗体 0.1ml
62279 Anti-AKT2 蛋白激酶B2 0.1ml
62280 Anti-RBC 人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA试剂盒 人红细胞单抗 0.2ml
62281 Anti-PR (progesterone receptor) 孕激素受体抗体 0.1ml
62282 Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190) 磷酸化孕激素受体抗体 0.1ml
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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