人大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
61883 Anti-Nephrin *抗体 0.1ml
61884 Anti-nectin 2/CD112 细胞黏附分子CD112抗体 0.2ml
61885 Anti-Nestin 巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体 0.1ml
61886 Anti-Nestin 巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体（大、小鼠） 0.1ml
61887 Anti-Neurobeachin 蛋白激酶锚定蛋白抗体 0.2ml
61888 Anti-AKAP95 蛋白激酶A锚定蛋白95抗体 0.2ml
61889 Anti-NeuN 神经元核抗原抗体 0.2ml
61890 Anti-Nrn1/Cpg15/Neuritin 转化神经突起蛋白抗体 0.2ml
61891 Anti-Neurocan 神经粘蛋白抗体 0.1ml
61892 Anti-NGB 脑红蛋白/神经血红蛋白抗体 0.1ml
61893 Anti-NeuroD1 神经元分化因子1抗体 0.2ml
61894 Anti-Neurofascin/Nfasc155 神经束蛋白-155 0.2ml
61895 Anti-NT 神经降压素抗体 0.2ml
61896 Anti-NF2/merlin 2型神经纤维瘤抗体 0.2ml
61897 Anti-Phospho-Merlin (Ser518) 磷酸化2型神经纤维瘤抗体 0.1ml
61898 Anti-NFATc1 活化T细胞核因子1蛋白 0.1ml
61899 Anti-NFAM1/CNAIP NFAM1抗体 0.2ml
61900 Anti-phospho-NFATc2(Ser326) 磷酸化NFATc2(Ser326)抗体 0.1ml
61901 Anti-NFBD1/MDC1 DNA损伤关卡蛋白1抗体 0.2ml
61902 Anti-NF-H 高分子量神经丝蛋白抗体 0.2ml
61903 Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100 细胞核因子/k基因结合核因子 p52/p100抗体 0.2ml
61904 Anti-Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870) 细胞核因子/k基因结合核因子p100抗体 0.1ml
61905 Anti-NFKB p65 细胞核因子/k基因结合核因子抗体 0.1ml
61906 Anti-Phospho-NFKB p65 (Ser276) 磷酸化细胞核因子NF-κB p65抗体 0.1ml
61907 Anti-Phospho-NFKB p65 (Ser468) 磷酸化细胞核因子NF-κB p65抗体 0.1ml
61908 Anti-phospho-NFKB p65 (Ser536) 磷酸化细胞核因子抗体 0.1ml
61909 Anti-NF-66 α-中连蛋白抗体 0.2ml
61910 Anti-NF-L/68kDa neurofilament 低分子量神经丝蛋白抗体 0.2ml
61911 Anti-NF-M 中分子量神经丝蛋白抗体 0.1ml
61912 Anti-NGAL/Lipocalin 2 脂质运载蛋白抗体 0.2ml
61913 Anti-NF-KappaB p105 细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 0.1ml
61914 Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser927) 磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 0.1ml
61915 Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser933) 磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 0.1ml
61916 Anti-NGFR/p75NTR 神经生长因子受体抗体 0.1ml
61917 Anti-NGF-beta 神经生长因子-β抗体 0.1ml
61918 Anti-NGN3 神经元素3抗体 0.2ml
61919 Anti-NGX6 鼻咽癌细胞相关基因6抗体 0.1ml
61920 Anti-NHE1 钠氢通道蛋白抗体 0.2ml
61921 Anti-NIK/MAPKKK14 NFkB诱导激酶抗体 0.2ml
61922 Anti-NIS 钠碘转运体蛋白抗体 0.2ml
61923 Anti-NIT2 NIT2蛋白抗体 0.2ml
61924 Anti-Substance P Receptor P物质受体抗体 0.1ml
61925 Anti-NK-2R 神经激肽A受体/K物质受体抗体 0.1ml
61926 Anti-NKA 神经激肽A抗体 0.2ml
61927 Anti-NKB 神经激肽B抗体 0.2ml
61928 Anti-NKG2A NK细胞受体2A抗体 0.2ml
61929 Anti-NKG2C NK细胞受体2C抗体 0.2ml
61930 Anti-NKG2D/CD314 NK细胞受体2D抗体 0.2ml
61931 Anti-NKR(Neuromedin B Receptor) 神经激肽B受体抗体 0.2ml
61932 Anti-NKR/Neurokin B receptor 神经激肽B受体抗体 0.2ml
61933 Anti-Nm23 肿瘤转移抑制基因抗体人大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒 0.1ml
61934 Anti-Nm23-H1 肿瘤抑制基因抗体 0.1ml
61935 Anti-Nm23-H2 肿瘤抑制基因抗体 0.2ml
61936 Anti-NMP22 核基质蛋白22抗体 0.2ml
61937 Anti-Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗体 0.1ml
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5人大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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