人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
53004 TBX2/T-box2 血栓素B2抗体(一种新发现的抑癌基因) 0.2ml
53005 FSH receptor 促卵泡刺激素受体抗体 0.1ml
53006 Follistatin 卵泡抑素抗体 0.1ml
53007 FSP/Spastin 纤维母细胞表面蛋白抗体 0.1ml
53008 FSH/FSHB 促卵泡刺激素抗体 0.1ml
53009 FHIT 脆性*三联体抗体 0.1ml
53010 Phospho-FHIT (Tyr114) 磷酸化脆性*三联体抗体 0.1ml
53011 Glucose 6 phosphatase alpha 葡萄糖6磷酸酶α抗体 0.2ml
53012 G6PD/Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase 葡萄糖-6磷酸脱氢酶抗体 0.1ml
53013 G protein beta subunit GI G蛋白/鸟苷酸结合蛋白抗体 0.2ml
53014 RASA3 Ras-GTP酶激活蛋白3抗体 0.2ml
53015 G protein beta 1/GNB1 G蛋白β1抗体/*核苷酸结合蛋白β亚基1 0.2ml
53016 G protein beta 2/GNB2 G蛋白β2抗体/*核苷酸结合蛋白β亚基2 0.2ml
53017 G protein beta 3/GNB3 G蛋白β3抗体/*核苷酸结合蛋白β亚基3 0.2ml
53018 G protein beta 4/GNB4 G蛋白β4抗体/*核苷酸结合蛋白β亚基4 0.2ml
53019 SLK/Fyn *蛋白激酶Fyn（同步原癌基因）抗体 0.2ml
53020 phospho-SLK/FYN (Tyr530) 磷酸化*蛋白激酶Fyn/同步原癌基因抗体 0.1ml
53021 GABA 兔抗γ1氨基丁酸抗体 0.2ml
53022 GARB1/GABAR γ1氨基丁酸受体β1抗体 0.1ml
53023 GABPB2 核呼吸因子2抗体 0.1ml
53024 Gab1 接头蛋白Gab 1抗体 0.1ml
53025 Phospho-Gab1 (Tyr627) 磷酸化接头蛋白Gab 1抗体 0.1ml
53026 Phospho-Gab1 (Tyr659) 磷酸化接头蛋白Gab 1抗体 0.1ml
53027 Gab2 接头蛋白Gab 2抗体 0.1ml
53028 phospho-GAB2(Ser623) 磷酸化接头蛋白Gab2抗体 0.1ml
53029 phospho-GAB2 (Tyr452) 磷酸化接头蛋白Gab 2抗体 0.1ml
53030 phospho-GAB2 (Tyr643) 磷酸化接头蛋白Gab2抗体 0.1ml
53031 phospho-GAB2 (Ser623) 磷酸化接头蛋白Gab 2抗体 0.1ml
53032 RASSF6 RAS家族关联结构域蛋白6抗体 0.2ml
53033 GABRA1 G1氨基丁酸A型受体α1抗体 0.1ml
53034 GABABR1 gamma氨基丁酸B型受体1抗体 0.2ml
53035 phospho-GABBR1 (Ser923) 磷酸化gamma氨基丁酸B型受体1抗体 0.1ml
53036 GABBR2/GB2 G氨基丁酸B型受体2抗体 0.1ml
53037 phospho-GABBR2 (Ser783) 磷酸化G氨基丁酸B型受体2抗体 0.1ml
53038 phospho-GABBR2 (Ser892) 磷酸化G氨基丁酸B型受体2抗体 0.1ml
53039 GABRG2/GABA A Receptor gamma 2 γ氨基丁酸γ2受体抗体 0.1ml
53040 phospho-GABRG2(Ser327) 磷酸化γ氨基丁酸γ2受体抗体 0.1ml
53041 GAD65 *脱羧酶-65抗体 0.1ml
53042 RHCE Rh血型C抗原抗体 0.2ml
53043 GAD67 *脱羧酶-67抗体 0.1ml
53044 Styk1 */*/*激酶STYK1抗体 0.2ml
53045 GAD65 *脱羧酶-65抗体(C端） 0.1ml
53046 GADD34 生长抑制DNA损伤基因34抗体 0.1ml
53047 GADD45 生长抑制DNA损伤基因45抗体 0.1ml
53048 GADD45B 生长抑制DNA损伤基因GADD45β抗体 0.1ml
53049 GADD153/CHOP/DDIT3 GADD153抗体 0.1ml
53050 phospho-GADD153 (Ser30) 磷酸化GADD153抗体 0.1ml
53051 AF 4 protein 原癌基因AF4蛋白抗体 0.2ml
53052 Galanin 神经节肽抗体人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒 0.2ml
53053 B MyB 转录因子MYB相关蛋白B抗体 0.2ml
53054 Galectin 3 半乳糖凝集素3抗体 0.1ml
53055 Galactose kinase/GALK1 半乳糖激酶1抗体 0.2ml
53056 Galectin 9 半乳糖凝集素9抗体 0.2ml
53057 GALT 磷酸半乳糖尿苷酸转移酶1抗体 0.2ml
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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