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上海纪宁酶联科技有限公司
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人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
46922 LN (laminin) 层粘连蛋白(多肽抗原) 0.5mg
46923 Laminin Beta1 peptide 层粘连蛋白β1抗原 0.5mg
46924 lamin A 核纤层蛋白A抗原 0.5mg
46925 LOX-1/OLR1 凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体 0.5mg
46926 LPLUNC1 人鼻咽癌癌基因多肽抗原 0.5mg
46927 LYVE-1(lymphalic vessel endotheilial hyaluronan receptor 1) 淋巴管内皮透明质酸受体抗原 0.5mg
46928 ACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管紧张素转换酶(抗原) 0.5mg
46929 Integrin alpha E2 peptide 整合素alpha E2抗原 0.5mg
46930 Mac-1 (Mac-1/CR3/CD11b+CD18) 巨噬细胞表面分子抗原 0.5mg
46931 Mafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A抗原 0.5mg
46932 MAGE-1 黑色素瘤相关 0.5mg
46933 MAPKK1 (MAP kinase kinase 1) 丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗原 0.5mg
46934 ASK1/MAPKKK5 细胞凋亡信号调节激酶1/丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原 0.5mg
46935 Maspin (mammary serine protease inhibitor) 抑癌基因抗原 0.5mg
46936 Matriptase 蛋白裂解酶(一种新的癌基因)抗原 0.5mg
46937 HCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene) 人巨细胞病毒UL49抗原 0.5mg
46938 MC-1R (melanocortin-1-receptor) 黑皮质素-1受体抗原 0.5ml
46939 Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) peptide 髓样细胞白血病-1抗原 0.5mg
46940 MDM2 (urine double minute 2) 双微体2癌基因抗原 0.5mg
46941 MDR1(multidrug resistance 1) 多药耐药蛋白抗原 0.5mg
46942 MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2) 肌细胞增强因子2抗原 0.5mg
46943 Mfn1 (Mitofusin1) 线粒体融合蛋白1 0.5mg
46944 MT(metallothionein) 金属硫蛋白抗原 0.5mg
46945 MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor) 层粘连蛋白受体1抗体 0.5mg
46946 MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 层粘连蛋白受体1抗原(C端) 0.5mg
46947 MK(Midkine) 中期因子/肝素结合生长因子抗原 0.5mg
46948 MLC/Myosin light chain 3 peptide 肌球蛋白轻链3抗原 0.5mg
46949 MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 巨噬细胞移动抑制因子抗原 0.5mg
46950 MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta) 巨噬细胞炎症因子1β 抗原 0.5mg
46951 CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta) CD122/白介素2受体β链抗原 0.5mg
46952 MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2) 巨噬细胞炎症蛋白2抗原 0.5mg
46953 MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基质金属蛋白酶13抗原 0.5mg
46954 MMP-20(matrix metalloproteinase 20) 基质金属蛋白酶20抗原 0.5mg
46955 MMP-17(Matrix metalloproteinase-17) 基质金属蛋白酶-17抗原 0.5mg
46956 MMP-26(Matrix metalloproteinase-26) 基质金属蛋白酶-26抗原 0.5mg
46957 MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基质金属蛋白酶-9抗原 0.5mg
46958 MMP-10(matrix metalloproteinase 10) 基质金属蛋白酶-10抗原 0.5mg
46959 MPO peptide 髓过氧化物酶抗原 0.5mg
46960 MRP2 (multidrug resistance-associated protein2) 多药耐药相关蛋白2 0.5mg
46961 MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5) 多药耐药相关蛋白5抗原 0.5mg
46962 MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28) 线粒体核糖体蛋白L28(抗原) 0.5mg
46963 MLH1(Mutl homolog l gene) 错配修复蛋白1抗原 0.5mg
46964 MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1) 胃粘液素抗原 0.5mg
46965 MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B) 褪黑素受体1B抗原 0.5mg
46966 MLN(Motilin)peptide 胃动素多肽 0.5mg
46967 mTOR(Mammalian target of rapamycin) 雷帕霉素靶蛋白 0.5mg
46968 Muc-1/CD227 粘蛋白-1/上皮膜 0.5mg
46969 MyD88 (myeloid differential protein-88) 髓样分化蛋白抗原 0.5mg
46970 PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周围神经髓鞘蛋白2抗原 0.5mg
46971 MYSM1(Myb-like, SWIRM and MPN domain-containing protein 1) MYSM1抗原 0.5mg
46972 MYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse MYOZ抗原 0.5mg
46973 CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 烟碱型乙酰*受体α7(多肽) 0.5mg
46974 Nanog fragment 干细胞关键蛋白(多肽)人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒 0.5mg
46975 Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 纳曲酮偶联牛血清白蛋白:纳曲酮偶联血蓝蛋白 0.5mg
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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