人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
45156 水杨酸乙基己酯标准品 Octisalate (Octyl Salicylate) 400mg 118-60-5
45157 *标准品 Ofloxacin 200mg 82419-36-1
45158 *相关物质A标准品 25mg 82419-52-1
45159 油酸标准品 Oleic Acid 1g 112-80-1
45160 油酰聚氧甘油酯标准品 Oleoyl Polyoxylglycerides 100mg
45161 油酸油醇酯标准品 Oleyl Oleate 0．5ml 3687-45-4
45162 橄榄油标准品 Olive Oil (AS) 1g 8001-25-0
45163 *标准品 Olanzapine 200mg 132539-06-1
45164 *相关物质A标准品 25mg 138564-59-7
45165 *相关物质B标准品 25mg 221176-49-4
45166 *杂质C标准品 5mg 174794-02-6
45167 *杂质A标准品 20mg 849206-43-5
45168 *标准品 Olopatadine Hydrochloride 150mg 140462-76-6
45169 奥洛他定相关物质B标准品 35mg 173174-07-7
45170 奥洛他定相关物质C标准品 35mg 55453-87-7
45171 *相关FG混合物标准品 25mg
45172 *标准品 Omeprazole 200mg 73590-58-6
45173 *相关物质A标准品 15mg 88546-55-8
45174 *镁标准品 Omeprazole Magnesium 10mg 95382-33-5
45175 昂丹司琼标准品 Ondansetron 300mg 99614-02-5
45176 *对照品标准品 Ondansetron Hydrochloride 300mg 103639-04-9
45177 *有关物质A标准品 50mg 119812-29-2
45178 *有关物质C标准品 30mg 27387-31-1
45179 昂丹司琼杂质D标准品 30mg 99614-64-9
45180 昂丹司琼分离度混合物标准品 Ondansetron Resolution Mixture 50mg
45181 奥比沙星标准品 Orbifloxacin 350mg 113617-63-3
45182 *标准品 Orlistat 200mg 96829-58-2
45183 *相关物质A标准品 25mg 104872-06-2
45184 *相关物质B标准品 10mg 19740-72-8
45185 *相关物质C标准品 25mg 791-28-6
45186 *相关物质D标准品 10mg 130793-27-0
45187 *相关物质E标准品 10mg
45188 枸櫞酸奧芬那君标准品 Orphenadrine Citrate 200mg 4682-36-4
45189 奧芬那君相关物质A标准品 50mg
45190 奧芬那君相关物质B标准品 20mg
45191 奧芬那君相关物质C标准品 20mg 10488-36-5
45192 磷酸奥斯他韦标准品 Oseltamivir Phosphate 200mg 204255-11-8
45193 奥塞米韦相关物质A标准品 Oseltamivir Related Compound A 10mg
45194 *标准品 Oxacillin Sodium 200mg 7240-38-2
45195 *对照品标准品 Oxaliplatin 125mg 61825-94-3
45196 *相关物质A标准品 100mg 6153-56-6
45197 *相关物质B标准品 15mg 66900-68-3
45198 *相关物质C标准品 20mg
45199 *相关物质D标准品 10mg 61758-77-8
45200 *相关物质F标准品 25mg 66845-32-7
45201 *标准品(系统使用性用) 25mg 61848-66-6
45202 氧雄龙标准品 Oxandrolone CIII 50mg 53-39-4
45203 氧雄龙相关物质A标准品人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA试剂盒 20mg
45204 氧雄龙相关物质B标准品 20mg 4424-45-7
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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