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上海纪宁酶联科技有限公司
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人C4结合蛋白(C4BP)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人C4结合蛋白(C4BP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人C4结合蛋白(C4BP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
38559 *相关物质A标准品 25mg
38560 *标准品 Sertraline Hydrochloride 100mg 79559-97-0
38561 *标准品 Sevoflurane 1ml 28523-86-6
38562 *相关物质A标准品 0.2ml 58109-34-5
38563 *标准品 100mg
38564 *相关物质B标准品 0.2ml 13171-18-1
38565 *相关物质C标准品 0.2ml 920-66-1
38566 *银标准品 Silver Sulfadiazine 200mg 22199-08-2
38567 N-乙酰神经氨酸标准品 N-Acetylneuraminic Acid 200mg 131-48-6
38568 *标准品 Silybin 50mg 22888-70-6
38569 水飞蓟宁标准品 Silydianin 20mg 29782-68-1
38570 二甲基硅油标准品 Simethicone 50g 8050-81-5
38571 西地那非杂质A标准品 10mg
38572 *标准品 Simvastatin 200mg 79902-63-9
38573 西布曲明相关物质A标准品 Sibutramine Related Compound A 20mg
38574 西布曲明相关物质B标准品 Sibutramine Related Compound B 20mg
38575 西布曲明相关物质C标准品 Sibutramine Related Compound C 20mg
38576 西布曲明相关物质D标准品 20mg 84467-94-7
38577 β-谷固醇β-谷固醇标准品 Beta-Sitosterol 300mg 83-46-5
38578 乙酸钠标准品 Sodium Acetate (AS) 1g 127-09-3
38579 抗坏血酸钠标准品 Sodium Ascorbate 200mg 134-03-2
38580 *标准品 Sodium Benzoate 1g 532-32-1
38581 *标准品 Sodium Bromide 1g 7647-15-6
38582 丁酸钠标准品 Sodium Butyrate 25mg 156-54-7
38583 *标准品 Sodium Bicarbonate (AS) 3g 144-55-8
38584 碳酸钠标准品 1g 497-19-8
38585 氯化钠标准品 Sodium Chloride (AS) 1g 7647-14-5
38586 柠檬酸钠标准品 Sodium Citrate (AS) 1g 6132/4/3
38587 氟化钠标准品 1g 7681-49-4
38588 乙二胺四乙酸铁钠标准品 Sodium Iron EDTA 200mg 15708-41-5
38589 乳酸钠标准品 Sodium Lactate 200mg 867-56-1
38590 *标准品 Sodium Nitroprusside 500mg 13755-38-9
38591 丙酸钠标准品 Sodium Propionate 200mg 6700-17-0
38592 *标准品 Sodium Salicylate 500mg 54-21-7
38593 羧甲基淀粉钠标准品(A型) Sodium Starch Glycolate Type A 400mg 9063-38-1
38594 羧甲基淀粉钠标准品(B型) Sodium Starch Glycolate Type B 400mg 9063-38-1
38595 硬脂富马酸钠标准品 Sodium Stearyl Fumarate 200mg 4070-80-8
38596 酒石酸钠标准品 Sodium Tartrate Dihydrate 500mg×4vials 6106-24-7
38597 人生长激素标准品 Somatropin 1 vial 12629-01-5
38598 山梨酸标准品 Sorbic Acid 1g 110-44-1
38599 1,4-脱水山梨糖醇标准品 1,4-Sorbitan 300mg 27299-12-3
38600 *标准品 Sorbitol 125mg 50-70-4
38601 *标准品 Sotalol Hydrochloride 300mg 959-24-0
38602 索他洛尔相关化合物A标准品 50mg 5576-49-8
38603 索他洛尔相关化合物B标准品 50mg
38604 索他洛尔相关化合物C标准品人C4结合蛋白(C4BP)ELISA试剂盒 50mg
38605 大豆粉标准品 Defatted Powdered Soy 2.5g 68513-95-1
38606 盐酸*标准品 Spectinomycin Hydrochloride 200mg 22189-32-8
38607 *标准品 Spironolactone 125mg 1952/1/7
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人C4结合蛋白(C4BP)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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