人胰岛素(INS)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人胰岛素(INS)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
31464 大隐静脉平滑肌细胞 5 × 105次方（1ml）
31465 冠状动脉平滑肌细胞 5 × 105次方（1ml）
31466 食管上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31467 食管平滑肌细胞 5 × 105次方（1ml）
31468 肠平滑肌细胞 5 × 105次方（1ml）
31469 肠粘膜上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31470 肠动脉内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31471 肠静脉内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31472 肝实质细胞 5 × 105次方（1ml）
31473 肝动脉内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31474 肝动脉平滑肌细胞 5 × 105次方（1ml）
31475 肝内胆管上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31476 小肠血管内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31477 小肠隐窝上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31478 胃粘膜上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31479 肝窦内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31480 肾实质细胞 5 ×105次方（1ml）
31481 肾系膜细胞 5 ×105次方（1ml）
31482 膀胱上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31483 膀胱平滑肌细胞 5 × 105次方（1ml）
31484 肾动脉内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31485 肾动脉平滑肌细胞 5 × 105次方（1ml）
31486 肾小管上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31487 肾小球内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31488 子宫内膜上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31489 卵巢颗粒细胞 5 × 105次方（1ml）
31490 淋巴管内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31491 淋巴成纤维细胞 5 × 105次方（1ml）
31492 外周血白细胞 5 × 105次方（1ml）
31493 胰岛β细胞 5 × 105次方（1ml）
31494 胰腺星状细胞 5 × 105次方（1ml）
31495 胰腺导管上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31496 颌下腺上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31497 腮腺细胞 5 × 105次方（1ml）
31498 视网膜微血管内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31499 小梁网细胞 5 × 105次方（1ml）
31500 视网膜色素上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31501 视网膜muller细胞 5 × 105次方（1ml）
31502 虹膜色素上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31503 晶状体上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31504 角膜上皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31505 角膜内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31506 视网膜神经节细胞 5 × 105次方（1ml）
31507 骨细胞 5 × 105次方（1ml）
31508 滑膜细胞 5 × 105次方（1ml）
31509 骨骼肌细胞 5 × 105次方（1ml）
31510 表皮角化细胞 5 × 105次方（1ml）
31511 真皮成纤维细胞 5 × 105次方（1ml）
31512 软骨细胞 5 × 105次方（1ml）
31513 破骨细胞 5 × 105次方（1ml）
31514 皮肤肥大细胞 5 × 105次方（1ml）
31515 前脂肪细胞 5 × 105次方（1ml）
31516 成骨细胞 5 × 105次方（1ml）
31517 脑动脉血管内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31518 脑动脉血管平滑肌细胞 5 × 105次方（1ml）
31519 脑静脉血管内皮细胞 5 × 105次方（1ml）
31520 脑静脉血管平滑肌细胞 5 × 105次方（1ml）
31521 脑膜细胞人胰岛素(INS)ELISA试剂盒 5 × 105次方（1ml）
31522 神经元细胞 5 ×105次方（1ml）
31523 神经胶质细胞 5 × 105次方（1ml）
31524 海马神经应细胞 5 × 105次方（1ml）
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5人胰岛素(INS)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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