人雌三醇(E3)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人雌三醇(E3)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
31162 HGF tRNA 人牙龈成纤维细胞总RNA 10 µg
31163 HPLF tRNA 人牙周膜成纤维细胞总RNA 10 µg
31164 HEEpiC tRNA 人食道上皮细胞总RNA 10 µg
31165 HESMC tRNA 人食道平滑肌细胞总RNA 10 µg
31166 HIMEC tRNA 人肠微血管内皮细胞总RNA 10 µg
31167 HISMC tRNA 人肠平滑肌细胞总RNA 10 µg
31168 HCSMC tRNA 人结肠平滑肌细胞总RNA 10 µg
31169 HPMEC tRNA 人肺微血管内皮细胞总RNA 10 µg
31170 HPAEC tRNA 人肺动脉内皮细胞总RNA 10 µg
31171 HPASMC tRNA 人肺动脉平滑肌细胞总RNA 10 µg
31172 HPAF tRNA 人肺动脉成纤维细胞总RNA 10 µg
31173 HPAEpiC tRNA 人肺泡上皮细胞总RNA 10 µg
31174 HBEpiC tRNA 人支气管上皮细胞总RNA 10 µg
31175 HTEpiC tRNA 人气管上皮细胞总RNA 10 µg
31176 HSAEpiC tRNA 人小气道上皮细胞总RNA 10 µg
31177 HPF tRNA 人肺成纤维细胞总RNA 10 µg
31178 HBSMC tRNA 人支气管平滑肌细胞总RNA 10 µg
31179 HTSMC tRNA 人气管平滑肌细胞总RNA 10 µg
31180 HSkMC tRNA 人骨骼肌细胞总RNA 10 µg
31181 HSkMSC tRNA 人骨骼肌卫星细胞总RNA 10 µg
31182 HSkMM tRNA 人骨骼肌成肌细胞总RNA 10 µg
31183 HRGEC tRNA 人肾小球内皮细胞总RNA 10 µg
31184 HRPTEpiC tRNA 人肾近曲小管上皮细胞总RNA 10 µg
31185 HRCEpiC tRNA 人肾皮质上皮细胞总RNA 10 µg
31186 HREpiC tRNA 人肾上皮细胞总RNA 10 µg
31187 HRMC tRNA 人肾系膜细胞总RNA 10 µg
31188 HBdSMC tRNA 人膀胱平滑肌细胞总RNA 10 µg
31189 HUC tRNA 人尿道上皮细胞总RNA 10 µg
31190 HBdSF tRNA 人膀胱基质成纤维细胞总RNA 10 µg
31191 HPEpiC tRNA 人前列腺上皮细胞总RNA 10 µg
31192 HPrF tRNA 人前列腺成纤维细胞总RNA 10 µg
31193 HPSMC tRNA 人前列腺平滑肌细胞总RNA 10 µg
31194 HCO tRNA 人颅骨造骨细胞总RNA 10 µg
31195 HS tRNA 人滑膜细胞总RNA 10 µg
31196 HNPC tRNA 人髓核细胞总RNA 10 µg
31197 HHSEC tRNA 人肝窦内皮细胞总RNA 10 µg
31198 HIBEpiC tRNA 人肝内胆管上皮细胞总RNA 10 µg
31199 HH tRNA 人肝细胞总RNA 10 µg
31200 HHSteC tRNA 人肝脏星形细胞总RNA 10 µg
31201 HCMEC tRNA 人心脏微血管内皮细胞总RNA 10 µg
31202 HAEC tRNA 人主动脉内皮细胞总RNA 10 µg
31203 HASMC tRNA 人主动脉平滑肌细胞总RNA 10 µg
31204 HCM tRNA 人心肌细胞总RNA 10 µg
31205 HCM-a tRNA 人心肌细胞-成人总RNA 10 µg
31206 HCF tRNA 人心脏成纤维细胞总RNA 10 µg
31207 HCF-av tRNA 人心肌细胞-成人心室总RNA 10 µg
31208 HCF-aa tRNA 人心肌细胞-成人心房总RNA 10 µg
31209 HCEpiC tRNA 人角膜上皮细胞总RNA 10 µg
31210 HK tRNA 人角膜细胞总RNA 10 µg
31211 HRPEpiC tRNA 人视网膜色素上皮细胞总RNA 10 µg
31212 HLEpiC tRNA 人晶状体上皮细胞总RNA 10 µg
31213 HIPEpiC tRNA 人虹膜色素上皮细胞总RNA 10 µg
31214 HConF tRNA 人结膜成纤维细胞总RNA 10 µg
31215 HNPCEpiC tRNA 人无色素睫状上皮细胞总RNA 10 µg
31216 HTMC tRNA 人小梁网细胞总RNA 10 µg
31217 HAmEpiC tRNA 人羊膜上皮细胞总RNA 10 µg
31218 HVT tRNA 人滋养层绒毛细胞总RNA 10 µg
31219 HVMF tRNA 人绒毛间叶成纤维细胞总RNA 10 µg
31220 HPA-v tRNA 人雌三醇(E3)ELISA试剂盒人前脂肪细胞-内脏总RNA 10 µg
31221 HPA-s tRNA 人前脂肪细胞-皮下总RNA 10 µg
31222 HMSC-bm tRNA 人间充质干细胞-骨髓总RNA 10 µg
31223 HMSC-ad tRNA 人间充质干细胞-脂肪总RNA 10 µg
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5人雌三醇(E3)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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