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上海纪宁酶联科技有限公司
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人5羟色铵(5-HT)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人5羟色铵(5-HT)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人5羟色铵(5-HT)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
29542 10805 脑心浸出液肉汤(BHI) 250g/瓶 用于细菌的增菌和培养
29543 10193 脑心浸出液琼脂(BHIA) 250g/瓶 用于细菌尤其是苛养菌的培养
29544 10204 营养肉汤普通 250g/瓶 用于细菌的增菌、复壮等
29545 11009 硫乙醇酸盐流体培养基 250g/瓶 用于浑浊制品需氧菌无菌试验
29546 10116 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 250g/瓶 用于低酸性罐头食品无菌检验
29547 10117 酸性肉汤 250g/瓶 用于酸性罐头食品无菌检验
29548 10114 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基 250g/瓶 用于灭菌效果检验
29549 11801 0.5%* 250g/瓶 用于无菌检查
29550 10107 胰酪胨大豆肉汤培养基 250g/瓶 用于细菌培养及抑菌剂效力检查
29551 10108 胰酪胨大豆琼脂培养基 250g/瓶 用于细菌培养及抑菌剂效力检查
29552 10155 TGC 培养基 250g/瓶 用于无菌检验(日本)
29553 10813 普通肉汤培养基 250g/瓶 用于*的增菌,也可用 于其它细菌的增菌(SN)
29554 11836 细菌保存培养基 250g/瓶 用于菌种培养与保存,可制备菌种保 存斜面(pH7.3)
29555 11704 SCDLP 液体培养基 250g/瓶 用于化妆品样品的增菌,每升培养基 中需添加 1 支 20107
29556 11209 菌种培养基 250g/瓶 用于菌种培养与保存,可制备菌种保 存斜面(pH6.5)
29557 10158 Letheen 琼脂基础 250g/瓶 用于化妆品卫生微生物检测,每升培 养基中需添加 1 支 20107
29558 10159 Letheen 肉汤基础 250g/瓶 用于化妆品卫生微生物检测,每升培养基中需添加 1 支 20204
29559 10160 改良 Letheen 琼脂基础 250g/瓶 用于化妆品卫生微生物检测(ISO), 每升培养基中需添加 1 支 20107
29560 10161 改良 Letheen 肉汤基础 250g/瓶 用于化妆品卫生微生物检测(ISO), 每升培养基中需添加 1 支 20204
29561 10162 血琼脂基础 2 号 250g/瓶 用于细菌的培养、分离和鉴别需添加5-10%脱纤维羊血
29562 10163 血液* 250g/瓶 用于血液中致病菌的分离
29563 10170 Eugon 肉汤 250g/瓶 广泛用于微生物的培养
29564 10171 Eugon 琼脂 250g/瓶 广泛用于微生物的培养
29565 10172 胰蛋白示磷酸盐肉汤 250g/瓶 用于苛养菌的增菌和培养
29566 12703 小牛浸液肉汤 250g/瓶 用于苛养菌的培养
29567 12704 小牛浸液琼脂 250g/瓶 用于苛养菌的培养
29568 11708 明胶培养基 250g/瓶 用于细菌的明胶生化试验
29569 10807 *发酵培养基 250g/瓶 用于*发酵试验
29570 10140 *培养基 250g/瓶 用于*发酵试验
29571 10146 醋酸铅培养基 250g/瓶 用于细菌产硫化氢试验,每 100ml培养基中添加 1 支 20104
29572 10147 溴甲酚紫琼脂基础(糖发酵基础) 250g/瓶 选择性添加 0.5-1%碳源,用于细菌 的分离和鉴别
29573 10148 溴甲酚紫肉汤基础 250g/瓶 选择性添加 0.5-1%碳源,用于细菌 的分离和鉴别
29574 10156 糖发酵培养基 250g/瓶 溴*蓝为指示剂,不含碳源, 用于糖发酵试验(GB、药典)
29575 10157 淀粉培养基 250g/瓶 用于细菌淀粉水解试验
29576 10410 葡萄糖半固体琼脂 250g/瓶 用于葡萄糖利用(产酸、产气)实 验
29577 11050 石蕊牛乳培养基 250g/瓶 用于测定细菌对牛乳的发酵
29578 10179 丙二酸钠培养基 250g/瓶 用于细菌生化鉴定
29579 10180 蛋白胨水培养基 250g/瓶 用于细菌靛基质试验
29580 10346 *双水解酶试验培养基 250g/瓶 用于细菌的*双水解酶试验
29581 10199 *脱羧酶试验培养基 250g/瓶 用于细菌的*脱羧酶试验
29582 10100 氨基酸脱羧酶试验对照培养基 250g/瓶 用于细菌的氨基酸试验对照
29583 12701 缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基 250g/瓶 用于细菌的 MR、VP 试验
29584 10103 营养琼脂(NA) 250g/瓶 用于菌落总数测定、菌种纯化和传 代
29585 10101 平板计数琼脂(PCA) 250g/瓶 用于细菌总数测定
29586 10112 R2A 琼脂 250g/瓶 用于水中菌落总数测定
29587 10115 TTC 营养琼脂 250g/瓶 用于细菌总数测定
29588 11502 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA) 250g/瓶 用于细菌总数测定、纯化、培养
29589 10104 *-吐温 80 营养琼脂培养基 250g/瓶 用于化妆品菌落总数测定,每升培 养基中添加 1 支 20107
29590 10119 胰化大豆坚固绿琼脂(TSFA) 250g/瓶 用于滤膜法细菌总数测定
29591 10120 改良平板计数琼脂人5羟色铵(5-HT)ELISA试剂盒(MPCA) 250g/瓶 用于乳及乳制品中菌落总数、嗜冷 菌、需氧芽孢菌的测定
29592 10123 2216E 琼脂 250g/瓶 用于海生细菌的计数和培养
29593 10130 酵母粉琼脂 250g/瓶 用于水中细菌总数的测定(ISO)
29594 10141 CVT 琼脂培养基 250g/瓶 用于乳及 乳制品中 嗜低温 细 菌总 数的测定
29595 10142 嗜冷菌计数琼脂 250g/瓶 用于乳及 乳制品中 嗜冷菌 菌 落总 数的测定(ISO)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人5羟色铵(5-HT)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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