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上海纪宁酶联科技有限公司
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人胆囊收缩素/肠促*肽(CCK)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人胆囊收缩素/肠促*肽(CCK)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人胆囊收缩素/肠促*肽(CCK)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
23517 番泻苷B 蕃泻苷B Sennoside B 128-57-4 HPLC≥98% 20mg/支
23518 番泻苷C 蕃泻苷C Sennoside C 37271-16-2 HPLC≥98% 20mg/支
23519 番泻苷D 蕃泻苷D Sennoside D 37271-17-3 HPLC≥98% 20mg/支
23520 紫草素 紫草醌;紫草宁;欧根草;紫根色素 Shikonin 517-89-5 HPLC≥98% 20mg/支
23521 川楝素 Toosendanin 58812-37-6 HPLC≥98% 20mg/支
23522 川芎嗪 Tetramethylpyrazine 1124-11-4 HPLC≥98% 20mg/支
23523 * Ligustrazine Hydrochloride 76494-51-4 HPLC≥98% 20mg/支
23524 异鼠李素 Isorhamnetin 480-19-3 HPLC≥98% 20mg/支
23525 D-(+)-木糖 D-(+)-Xylose 58-86-6 HPLC≥99% 20mg/支
23526 积雪草苷 亚细亚皂苷 Asiaticoside 16830-15-2 HPLC≥98% 20mg/支
23527 羟基积雪草苷 Madecassoside 34540-22-2 HPLC≥98% 20mg/支
23528 积雪草酸 Asiatic acid 464-92-6 HPLC≥98% 20mg/支
23529 羟基积雪草酸 Madecassic acid 18449-41-7 HPLC≥98% 20mg/支
23530 β-谷甾醇 β-Sitosterol 83-46-5 HPLC≥98% 20mg/支
23531 * 辣椒素(天然纯化分离) Capsaicin 404-86-4 HPLC≥98% 20mg/支
23532 二氢* 二氢辣椒素 Dihydrocapsaicin 19408-84-5 HPLC≥98% 20mg/支
23533 胡椒碱 胡椒酰胺 Piperine 94-62-2 HPLC≥99% 20mg/支
23534 鸢尾黄素 Tectorigenin 548-77-6 HPLC≥98% 20mg/支
23535 鸢尾苷 射干苷 Tectoridin 611-40-5 HPLC≥98% 20mg/支
23536 五味子甲素 Schizandrin A 61281-38-7 HPLC≥98% 20mg/支
23537 五味子乙素 Schizandrin B 61281-37-6 HPLC≥98% 20mg/支
23538 五味子醇甲 Schisandrol A 7432-28-2 HPLC≥98% 20mg/支
23539 五味子酯乙 Schisantherin B 58546-55-7 HPLC≥98% 20mg/支
23540 五味子酯甲 Schisantherin A 58546-56-8 HPLC≥98% 20mg/支
23541 五味子醇乙 Schisandrol B 分子式:C23H28O7
分子量:416.47 HPLC≥98% 20mg/支
23542 * *3;*P;烟碱酰胺;尼古丁酰胺 Nicotinamide 98-92-0 HPLC≥99.5% 50mg/支
23543 西红花苷 藏红花素;番红花苷 Crocin 42553-65-1 Standard(标准) 20mg/支
23544 西红花苷I Crocin I 94238-00-3 HPLC≥97% 20mg/支
23545 西红花苷II Crocin II 55750-84-0 HPLC≥98% 20mg/支
23546 桑色素 桑黄素 Morin hydrate 480-16-0;654055-01-3 HPLC≥98% 20mg/支
23547 D-(-)-奎宁酸 右旋奎宁酸;D-(-)-奎尼酸;奎宁酸;奎尼酸 D-(−)-Quinic acid 77-95-2 ≥98% 20mg/支
23548 梓醇 Catalpol 2415-24-9 HPLC≥98% 20mg/支
23549 根皮苷 Phlorizin 60-81-1 HPLC≥98% 20mg/支
23550 蜕皮激素 β-蜕皮激素;β-蜕皮甾酮 Ecdysterone 5289-74-7 HPLC≥98% 20mg/支
23551 6-姜酚 姜辣素;姜酮醇 6-gingerol 23513-14-6 HPLC≥98% 20mg/支
23552 蒿本内酯 藁本内酯 Ligustilide 4431-01-0; 81944-09-4 HPLC≥98% 20mg/支
23553 脱氧野尻霉素 1-脱氧野尻霉素 1-Deoxynojirimycin 19130-96-2 HPLC≥98% 5mg/支
23554 土木香内酯 Alantolactone 546-43-0 HPLC≥98% 20mg/支
23555 柠檬苦素 吴茱萸内酯 Limonin 1180-71-8 HPLC≥98% 20mg/支
23556 诺米林 Nomilin 1063-77-0 HPLC≥98% 20mg/支
23557 河豚毒素 河豚毒 Tetrodotoxin 224-458-8 HPLC≥99% 1mg/支
23558 罗汉果皂苷V 罗汉果苷V;罗汉果甜苷V;罗汉果皂甙V;罗汉果甜甙V Mogroside Ⅴ 88901-36-4 HPLC≥98% 20mg/支
23559 安石榴甙 安石榴苷 Punicalagin 65995-63-3 HPLC≥98% 20mg/支
23560 獐牙菜苦苷 獐牙菜苦甙;獐牙菜苦素 Swertiamarin 17388-39-5 HPLC≥98% 20mg/支
23561 朝藿定A 淫羊霍定A Epimedin A 110623-72-8 HPLC≥98% 20mg/支
23562 朝藿定B 淫羊霍定B Epimedin B 110623-73-9 HPLC≥98% 20mg/支
23563 朝藿定C 淫羊藿苷C;宝藿苷VI Epmedin C 110642-44-9 HPLC≥98% 20mg/支
23564 * 洛伐司他汀;汀洛伐他丁 Lovastatin 75330-75-5 HPLC≥98% 20mg/支
23565 芒柄花黄素 刺芒柄花素;芒柄花素 Formononetin 485-72-3 HPLC≥98% 20mg/支
23566 拟人参皂苷F11 Pseudoginsenoside F11 69884-00-0 HPLC≥98% 20mg/支
23567 人参皂苷Rb1人胆囊收缩素/肠促*肽(CCK)ELISA试剂盒 Ginsenoside Rb1 41753-43-9 HPLC≥98% 20mg/支
23568 人参皂苷Rb2 Ginsenoside Rb2 11021-13-9 HPLC≥98% 20mg/支
23569 人参皂苷Rb3 Ginsenoside Rb3 68406-26-8 HPLC≥98% 20mg/支
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人胆囊收缩素/肠促*肽(CCK)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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