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上海纪宁酶联科技有限公司
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人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
21200 龙胆苦苷 gentiopicrin HPLC≥98% 20mg/支
21201 胆酸 Cholic acid HPLC≥98% 20mg/支
21202 * Hyodeoxycholic acid UV≥98% 20mg/支
21203 去氧胆酸 Deoxycholic acid HPLC≥98% 20mg/支
21204 芝麻素 Sesamin HPLC≥98% 20mg/支
21205 芝麻林素 Sesamolin HPLC≥98% 20mg/支
21206 多巴 Levodopa UV≥99% 20mg/支
21207 * Paclitaxel HPLC≥98% 20mg/支
21208 栀子苷(京尼平苷) Geniposide HPLC≥98% 20mg/支
21209 大麦芽碱 Hordenine HPLC≥95% 20mg/支
21210 厚朴酚 Magnolol HPLC≥98% 20mg/支
21211 和厚朴酚 Honokiol HPLC≥98% 20mg/支
21212 番泻苷A Sennoside A HPLC≥98% 20mg/支
21213 番泻苷B Sennoside B HPLC≥99% 20mg/支
21214 番泻苷C Sennoside C HPLC≥98% 20mg/支
21215 番泻苷D Sennoside D HPLC≥98% 20mg/支
21216 紫草素 Shikonin HPLC≥99% 20mg/支
21217 川楝素 Toosendanin HPLC≥98% 10mg/支
21218 川芎嗪 2,3,5,6-Tetramethylpyrazine HPLC≥98% 20mg/支
21219 * Ligustrazine Hydrochloride HPLC≥98% 20mg/支
21220 异鼠李素 Isorhamnetin HPLC≥98% 20mg/支
21221 D-(+)-木糖 D-(+)-Xylose HPLC≥99% 20mg/支
21222 积雪草苷 Asiaticoside HPLC≥90% 20mg/支
21223 羟基积雪草苷 Madecassoside HPLC≥98% 20mg/支
21224 积雪草酸 Asiatic acid HPLC≥98% 20mg/支
21225 羟基积雪草酸 Madecassic acid HPLC≥98% 20mg/支
21226 β-谷甾醇 β-Sitosterol HPLC≥98% 20mg/支
21227 *(辣椒素) Capsaicin HPLC≥98% 20mg/支
21228 二氢* Dihydrocapsaicin HPLC≥98% 20mg/支
21229 胡椒碱 Piperine HPLC≥99% 20mg/支
21230 鸢尾黄素 Tectorigenin HPLC≥98% 20mg/支
21231 鸢尾苷(射干苷) Tectoridin HPLC≥98% 20mg/支
21232 五味子甲素 Schizandrin A HPLC≥98% 20mg/支
21233 五味子乙素 Schizandrin B HPLC≥98% 20mg/支
21234 五味子醇甲 Schisandrin HPLC≥98% 20mg/支
21235 五味子酯乙 Schizandrol B HPLC≥98% 20mg/支
21236 五味子酯甲 Schizandrol A HPLC≥98% 20mg/支
21237 五味子醇乙 Schisandrol B HPLC≥98% 20mg/支
21238 * Nicotinamide HPLC≥99.5% 50mg/支
21239 西红花苷(藏红花素,番红花苷) Crocin Standard(标准) 20mg/支
21240 西红花苷I Crocin I HPLC≥97% 20mg/支
21241 西红花苷II Crocin II HPLC≥98% 20mg/支
21242 桑色素 Morin HPLC≥98% 20mg/支
21243 D-(-)-奎宁酸 D-(−)-Quinic acid ≥98% 20mg/支
21244 梓醇 catalpol HPLC≥98% 20mg/支
21245 根皮苷 phloridzin HPLC≥99% 20mg/支
21246 蜕皮激素 Ecdysterone HPLC≥98% 20mg/支
21247 6-姜酚(姜辣素) 6-gingerol HPLC≥98% 20mg/支
21248 蒿本内酯人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒 Z-Ligustilide HPLC≥90% 20mg/支
21249 脱氧野尻霉素(DNJ) 1-Deoxynojirimycin HPLC≥98% 20mg/支
21250 剑麻皂苷元 sisalagenin HPLC≥98% 20mg/支
21251 柠檬苦素 Limonin HPLC≥98% 20mg/支
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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