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上海纪宁酶联科技有限公司
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人乙酰*(ACH)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人乙酰*(ACH)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人乙酰*(ACH)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
20273 PFKP(Human phosphofructokinase-plaet) ELISA Kit 人血小板型磷酸果糖激酶 96T
20274 UGCG(Human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit 人尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶 96T
20275 Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人凋亡相关半*肽酶4 96T
20276 PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇*6激酶 96T
20277 DPYSL2(human dihydropyrimidinase-like 2) ELISA Kit 人二氢嘧啶酶样2 96T
20278 SGK2(Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2) ELISA KIT 人血清/糖皮质激素调节激酶2 96T
20279 MKK6(Human mitogen activated protein kinase kinase 6) ELISA Kit 人丝裂原活化蛋白激酶激酶6 96T
20280 PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇*6磷酸酶 96T
20281 Tgtp(Human T-cell specific GTPase) ELISA Kit 人T细胞特异性鸟苷三磷酸酶 96T
20282 FDFT1(Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1) ELISA Kit 人法尼基二磷酸法尼基转移酶1 96T
20283 D-LDH(Human D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人D-乳酸脱氢酶 96T
20284 Alpha1-AT(Human Alpha1-Antitrypsin) ELISA Kit 人α1抗* 96T
20285 KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人*1 96T
20286 KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人*6 96T
20287 PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit 人磷酸化乙酰* 96T
20288 PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit 人磷酸甘油酸变位酶2 96T
20289 PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶 96T
20290 PPIL1(Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1) ELISA Kit 人肽酰脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样1 96T
20291 MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 96T
20292 ACE I (Human Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅰ转化酶 96T
20293 AP(Human Aprotinin) ELISA Kit 人* 96T
20294 Casp-12(Human Caspase 12) ELISA Kit 人胱天蛋白酶12 96T
20295 PKA(Human Protein kinase A) ELISA Kit 人蛋白激酶A 96T
20296 ADAM10(Human A Disintegrin And Metalloprotease 10) ELISA Kit 人解整合素样金属蛋白酶10 96T
20297 MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶11 96T
20298 TS(Human thymidylate synthetase) ELISA Kit 人胸苷酸合成酶 96T
20299 TPHuman thymidinephosphorylase) ELISA Kit 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶 96T
20300 PARP(Human Poly ADP ribose polymerase) ELISA Kit 人多聚ADP核糖聚合酶 96T
20301 GCK(Human glucokinase) ELISA Kit 人葡萄糖激酶 96T
20302 MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit 人单胺氧化酶 96T
20303 cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit 人胞浆型磷脂酶A2 96T
20304 DAO(Human diamine oxidase) ELISA Kit 人二胺氧化酶 96T
20305 COX-2(Human cyclooxygenase-2) ELISA Kit 人环加氧酶2 96T
20306 CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit 人周期素依赖性激酶5 96T
20307 KLK 10(Human Kallikrein 10) ELISA Kit 人*10 96T
20308 PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人磷酯酶Cγ链 96T
20309 NA(Human neuraminidase) ELISA Kit 人神经氨酸酶 96T
20310 PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酰肌醇特异性磷酯酶C 96T
20311 PLC(Human Phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酶C 96T
20312 Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit 人*激酶2 96T
20313 ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit 人白介素1β转换酶 96T
20314 ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit 人整合素连接激酶1 96T
20315 CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit 人细胞色素P450c21B/21-羟化酶 96T
20316 TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit 人末端脱氧核苷酸转移酶 96T
20317 IDO(Human indoleamine 2,3-dioxygenase) ELISA Kit 人吲哚胺2,3-双加氧酶 96T
20318 PRSS(Human serine protease) ELISA Kit 人*蛋白酶 96T
20319 Syk(Human spleen tyrosine kinase) ELISA Kit 人脾脏*激酶 96T
20320 STK(Human serine/threonine protein kinase) ELISA Kit 人*/*蛋白磷酸酶 96T
20321 IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit 人白介素受体相关激酶 96T
20322 UK(Human urokinase) ELISA Kit 人乙酰*(ACH)ELISA试剂盒人* 96T
20323 PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人乙酰*(ACH)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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