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上海纪宁酶联科技有限公司
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人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
19047 AFP-L2(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2) ELISA Kit 人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2 96T
19048 FS ELISA Kit 大鼠卵泡抑素 96T
19049 (Mouse ovarian cancer marker-CA125) ELISA Kit 小鼠卵巢癌标志物CA125 96T
19050 HD ELISA Kit 大鼠组织蛋白去乙酰化酶 96T
19051 AFP-L1(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1) ELISA Kit 人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1 96T
19052 (Mouse mammary carcinoma Marker-CA153) ELISA Kit 小鼠乳腺癌标志物-CA153 96T
19053 (Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199) ELISA Kit 小鼠胃肠癌标志物CA199 96T
19054 MART/Melan-A(Human Melanoma Marker A) ELISA Kit 人黑色素瘤标记物 96T
19055 E-Selectin/CD62E ELISA Kit 大鼠E选择素 96T
19056 CK-HMW(Human cytokeratin High Molecular Weight) ELISA Kit 人高分子量细胞角蛋白 96T
19057 HO-1(Mouse heme oxygenase 1) ELISA Kit 小鼠血红素氧合酶1 96T
19058 Methylase ELISA Kit 大鼠甲基化酶 96T
19059 PCNA ELISA Kit 大鼠抗增殖细胞核抗原抗体 96T
19060 PL-A2(Mouse Phospholipidase A2) ELISA Kit 小鼠磷脂酶A2 96T
19061 PHC(Human primary hepatic carcinoma) ELISA Kit 人肝癌抗原 96T
19062 Apaf-1(Human apoptosis protease activating factor-1) ELISA Kit 人凋亡蛋白酶激活因子1 96T
19063 TFPI(Mouse Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit 小鼠组织因子途径抑制物 96T
19064 LPL ELISA Kit 大鼠脂蛋白脂酶 96T
19065 TRACP-5b ELISA Kit 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b 96T
19066 NPC(Human nasopharyngeal carcinoma) ELISA Kit 人鼻咽癌 96T
19067 AQP-5(Mouse Aquaporin 5) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白5 96T
19068 GIP ELISA Kit 大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽 96T
19069 UBC(Human urinary bladder cancer antigen) ELISA Kit 人膀胱癌抗原 96T
19070 AQP-4(Mouse Aquaporin 4) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白4 96T
19071 GP-II ELISA Kit 大鼠糖原磷酸化酶同工酶II 96T
19072 P-CK(Human pan-cytokeratin) ELISA Kit 人广谱细胞角蛋白 96T
19073 AQP-3(Mouse Aquaporin 3) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白3 96T
19074 AQP-1(Mouse Aquaporin 1) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白1 96T
19075 GP-MM ELISA Kit 大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM 96T
19076 Human Oncogene Protein p190/bcr-abl ELISA Kit 人癌基因蛋白质p190/bcr-abl 96T
19077 GP-BB ELISA Kit 大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB 96T
19078 BTA(Human Bladder tumor antigen) ELISA Kit 人膀胱肿瘤抗原 96T
19079 AQP-0(Mouse Aquaporin 0) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白0 96T
19080 AQP-2(Mouse Aquaporin 2) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白2 96T
19081 MK(Human Midkine) ELISA Kit 人中期因子 96T
19082 TAb ELISA Kit 大鼠甲状腺素抗体 96T
19083 Bid(Human BH3 interacting domain death agonist) ELISA Kit 人BH3结构域凋亡诱导蛋白 96T
19084 TRAb ELISA Kit 大鼠抗促甲状腺素受体抗体 96T
19085 TG(Mouse Thyroglobulin) ELISA Kit 小鼠甲状腺球蛋白 96T
19086 INH-A(Mouse Inhibin) ELISA Kit 小鼠抑制素A 96T
19087 CA ELISA Kit 大鼠儿茶酚胺 96T
19088 Bcl-2(Human B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA Kit 人B细胞淋巴瘤因子2 96T
19089 Beta-CG(Mouse Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit 小鼠绒毛膜*β 96T
19090 TSGF(Human Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) ELISA Kit 人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子 96T
19091 IL-27 ELISA Kit 大鼠白介素27 96T
19092 IL-33 ELISA Kit (human) 人白介素23 96T
19093 SHBG(Mouse sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 小鼠性激素结合球蛋白 96T
19094 PEDF(Human pigment epithelium-derived factor) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子 96T
19095 CC16(Human Clara cell protein) ELISA Kit 人克拉拉细胞蛋白 96T
19096 DHEA-S7(Mouse Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit 小鼠脱氢表雄酮S7 96T
19097 CT-1 ELISA Kit人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒 大鼠心肌营养素1 96T
19098 Alpha-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit 大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA 96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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