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上海纪宁酶联科技有限公司
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人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
18885 DKK1(Human Dickkopf 1) ELISA Kit 人Dickkopf 1 96T
18886 C4 ELISA Kit 大鼠补体蛋白4 96T
18887 IMA(Mouse Ischemia Modified Albumin) ELISA Kit 小鼠缺血修饰白蛋白 96T
18888 PKB(Mouse protein kinase B) ELISA Kit 小鼠蛋白激酶B 96T
18889 KLK 11(Human Kallikrein 11) ELISA Kit 人*11 96T
18890 Renin ELISA Kit 大鼠肾素 96T
18891 ANX- V ELISA Kit 大鼠膜联蛋白Ⅴ 96T
18892 sIgA(Mouse secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 小鼠分泌型免疫球蛋白A 96T
18893 HO-2(Mouse heme oxygenase 2) ELISA Kit 小鼠血红素氧合酶2 96T
18894 AECA ELISA Kit 大鼠抗内皮细胞抗体 96T
18895 i-PTH ELISA Kit 大鼠全段甲状旁腺素 96T
18896 CED-3(Human caenorhabditis elegans death gene) ELISA Kit 人美丽线虫凋亡基因 96T
18897 Cr(Mouse Crosslaps) ELISA Kit 小鼠骨胶原交联 96T
18898 TLa(Human thymus-leukemia antigen) ELISA Kit 人胸腺白血病抗原 96T
18899 FSH(mouse follicle-stimulating hormone) ELISA Kit 小鼠促卵泡素 96T
18900 CIAP ELISA Kit 大鼠牛小肠碱性磷酸酶 96T
18901 SP-A ELISA Kit 大鼠肺表面活性物质相关蛋白A 96T
18902 C I CP(Mouse cross-linked C-opeptides of Type I collagen) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽 96T
18903 TSTA(Human tumor specific transplantation antigen) ELISA Kit 人肿瘤特异性移植抗原 96T
18904 DPD(Mouse deoxypyridinoline) ELISA Kit 小鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉 96T
18905 PCX(Human Podocalyxin) ELISA Kit 人足细胞标记蛋白/足盂蛋白 96T
18906 CC16 ELISA Kit 大鼠克拉拉细胞蛋白 96T
18907 EPI ELISA Kit 大鼠肾上腺素 96T
18908 PY(Mouse pyridinium crosslink/PyriLinks) ELISA Kit 小鼠吡啶交联物 96T
18909 BRCA-1(Human breast cancer susceptibility protein 1) ELISA Kit 人乳腺癌易感蛋白1 96T
18910 TALLA-1/CD231(Human T-cell acute lymphoblastic leukemia antigen) ELISA Kit 人T细胞急性淋巴母细胞白血病相关抗原 96T
18911 OPN(Mouse Osteopontin) ELISA Kit 小鼠骨桥素 96T
18912 MPO-ANCA IgG ELISA Kit 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG 96T
18913 C3 ELISA Kit 大鼠补体蛋白3 96T
18914 Ag-NORs(Human Argyrophilic nucleolar organizer region proteins) ELISA Kit 人核仁形成区嗜银蛋白 96T
18915 ACTH(mouse adrencocorticotropic hormone) ELISA Kit 小鼠促肾上腺皮质激素 96T
18916 AZT ELISA Kit 大鼠* 96T
18917 ALP-B(Mouse Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 小鼠骨特异性碱性磷酸酶B 96T
18918 Trx(Human Thioredoxin) ELISA Kit 人硫氧化还原蛋白 96T
18919 Cav-1(Human Caveolin-1) ELISA KIT 人窖蛋白 96T
18920 DA ELISA Kit 大鼠多巴胺 96T
18921 TFR/CD71(Mouse transferrin receptor) ELISA Kit 小鼠转铁蛋白受体 96T
18922 U-TSH ELISA Kit 大鼠高灵敏度促甲状腺激素 96T
18923 Cys-C(Mouse Cystatin C) ELISA Kit 小鼠半*蛋白酶抑制剂/胱抑素C 96T
18924 CALLA(Human common acute lymphocytic leukaemia antigen) ELISA Kit 人普通急性淋巴细胞白血病抗原 96T
18925 MSH(Human melanocyte stimulating hormone) ELISA Kit 人黑色素细胞刺激素 96T
18926 F VIII Ag(Mouse Factor VIII -related Antigen) ELISA Kit 小鼠第八因子相关抗原 96T
18927 u-T4 ELISA Kit 大鼠高敏甲状腺素 96T
18928 EK(Human epidermal keratin) ELISA Kit 人表皮角蛋白 96T
18929 GAD-Ab ELISA Kit 大鼠*脱羧酶自身抗体 96T
18930 M2-PK(Mouse Pyruvate Kinase) ELISA Kit 小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶 96T
18931 CYFRA21-1(Human cytokeratin fragment antigen 21-1) ELISA Kit 人细胞角蛋白21-1片段 96T
18932 PRL(mouse prolactin) ELISA Kit 小鼠催乳素 96T
18933 PTHrP ELISA Kit 大鼠甲状旁腺激素相关蛋白 96T
18934 ACA-IgG ELISA Kit 人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 大鼠抗心磷脂抗体IgG 96T
18935 Resistin(Mouse Resistin) ELISA Kit 小鼠抵抗素 96T
18936 CDT(Human carbohydrate-deficient transferrin) ELISA Kit 人糖缺失性转铁蛋白 96T
18937 Dsg-1(Human desmogleins 1) ELISA Kit 人桥粒芯糖蛋白-1 96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人白介素11(IL-11)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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