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上海纪宁酶联科技有限公司
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人白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
18725 OVA sIgE ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特异性IgE 96T
18726 CNTF(Human Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit 人睫状神经营养因子 96T
18727 CD30(Human Cluster of differentiation 30) ELISA Kit 人CD30分子 96T
18728 CNP ELISA Kit 大鼠C型钠尿肽 96T
18729 NT-4(Mouse Neurotrophin 4) ELISA kit 小鼠神经生长因子4 96T
18730 Alpha-GST ELISA Kit 大鼠α*S转移酶 96T
18731 OPG(Mouse Osteoprotegerin) ELISA KIT 小鼠骨保护素 96T
18732 CXCR1(Human CXC-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人CXC趋化因子受体1 96T
18733 XCR1(Human XC-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人XC趋化因子受体1 96T
18734 BF(Mouse factor B) ELISA Kit 小鼠B因子 96T
18735 Hcy ELISA Kit 大鼠同型半* 96T
18736 GR- Beta ELISA Kit 大鼠糖皮质激素受体β 96T
18737 SLC/CCL21(Human secondary lymphoid-tissue chemokine) ELISA Kit 人二级淋巴组织趋化因子 96T
18738 OSM(Mouse Oncostatin-M) ELISA KIT 小鼠抑瘤素M 96T
18739 PDGFsR- Alpha(Mouse Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor Alpha) ELISA kit 小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α 96T
18740 GR- Alpha ELISA Kit 大鼠糖皮质激素受体α 96T
18741 E-Cad(Human E-Cadherin) ELISA Kit 人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白 96T
18742 BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 人脑源性神经营养因子 96T
18743 Col IV ELISA KIT 大鼠Ⅳ型胶原 96T
18744 PDGF-AB(Mouse Plaet-Derived Growth Factor AB) ELISA kit 小鼠血小板衍生生长因子AB 96T
18745 P-Selectin/CD62P(Mouse P-Selectin) ELISA kit 小鼠P选择素 96T
18746 HK ELISA Kit 大鼠己糖激酶 96T
18747 ALCAM(Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 人白细胞活化黏附因子 96T
18748 GSK ELISA Kit 大鼠糖原合成酶激酶 96T
18749 ACV-A(Human Activin A) ELISA Kit 人活化素A 96T
18750 PAL(Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit 小鼠L苯*解氨酶 96T
18751 sCD30L(Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand) ELISA Kit 小鼠可溶性CD30配体 96T
18752 NRG-1(human Neuregulin 1) ELISA Kit 人神经调节蛋白1 96T
18753 CXCL16 ELISA Kit 大鼠CXC趋化因子配体16 96T
18754 ANP(Human Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 人心钠肽 96T
18755 u-T3 ELISA Kit 大鼠高敏三碘甲状腺原氨酸 96T
18756 SCF/MGF(Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit 小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子 96T
18757 SDF-1 Beta/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit 小鼠基质细胞衍生因子1β 96T
18758 Bid ELISA Kit 大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白 96T
18759 D2R(Human dopamine D2 receptor) ELISA Kit 人多巴胺D2受体 96T
18760 EM-2(Human endomorphin-2) ELISA Kit 人内*肽-2 96T
18761 TGF- Beta1(Mouse Transforming Growth factor Beta1) ELISA kit 小鼠转化生长因子β1 96T
18762 Casp-9 ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶9 96T
18763 Alpha-EP(Human Alpha-Endomorphin) ELISA Kit 人α-内*肽 96T
18764 Orexin A ELISA Kit 大鼠阿立新A 96T
18765 TNFsR- I (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor I ) ELISA KIT 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ 96T
18766 Casp-3 ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶3 96T
18767 TNFsR- II (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor II ) ELISA KIT 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ 96T
18768 INH(Human Inhibin) ELISA Kit 人抑制素 96T
18769 NAIP(Human neuronal apoptosis inhibitory protein) ELISA Kit 人神经元凋亡抑制蛋白 96T
18770 TNF- Alpha(Mouse Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT 小鼠肿瘤坏死因子α 96T
18771 Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B细胞淋巴瘤因子2 96T
18772 CXCR3 ELISA Kit 人白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒大鼠CXC趋化因子受体3 96T
18773 TNF- Beta(Mouse Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 小鼠肿瘤坏死因子β 96T
18774 OX-B(Human Orexin B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B 96T
18775 Col IV (Mouse Collagen Type IV ) ELISA KIT 小鼠Ⅳ型胶原 96T
18776 NE ELISA Kit 大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶 96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人白介素13(IL-13)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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