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上海纪宁酶联科技有限公司
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人白介素13(IL-13)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人白介素13(IL-13)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人白介素13(IL-13)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
18673 IFN- Gamma(Human Interferon Gamma) ELISA Kit 人γ干扰素 96T
18674 LN(Mouse Laminin) ELISA Kit 小鼠层连蛋白/板层素 96T
18675 大鼠淋巴细胞因子ELISA Kit 大鼠淋巴细胞因子 96T
18676 ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit 人细胞间粘附分子1 96T
18677 HGF(Human hepatocyte growth factor) ELISA kit 人肝细胞生长因子 96T
18678 M-CSF(Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA Kit 小鼠巨噬细胞集落刺激因子 96T
18679 mALB ELISA Kit 大鼠微量蛋白 96T
18680 MDC/CCL22(Mouse Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit 小鼠巨噬细胞来源的趋化因子 96T
18681 AcSDKP ELISA Kit 大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-* 96T
18682 GM-CSF(Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 96T
18683 GDNF(Human glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA KIT 人胶质细胞系来源的神经营养因子 96T
18684 PA-IgG/M/A ELISA Kit 大鼠抗血小板抗体IgG/M/A 96T
18685 RANTES/CCL5(Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA Kit 小鼠正常T细胞表达和分泌因子 96T
18686 MIP-2(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2) ELISA Kit 小鼠巨噬细胞炎性蛋白2 96T
18687 NTX)ELISA Kit 大鼠Ⅰ型胶原N末端肽 96T
18688 G-CSF(Human Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒细胞集落刺激因子 96T
18689 NAP-2/CXCL7(Human neutrophil activating protein-2) ELISA Kit 人中性粒细胞趋化蛋白2 96T
18690 HSP-27 ELISA Kit 大鼠热休克蛋白27 96T
18691 OT(Mouse oxytocin) ELISA Kit 小鼠催产素 96T
18692 MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Mouse macrophage inflammatory protein 3 Beta) ELISA Kit 小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β 96T
18693 大鼠Smad1 ELISA Kit 大鼠Smad1 96T
18694 Human fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 人趋化因子 96T
18695 大鼠Smad7 ELISA Kit 大鼠Smad7 96T
18696 NTX(Mouse cross linked N-opeptide of type I collagen) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型胶原N末端肽 96T
18697 bFGF-9(Human basic fibroblast growth factor 9) ELISA Kit 人碱性成纤维细胞生长因子9 96T
18698 5-NT(Mouse 5-Nucleotidase) ELISA Kit 小鼠5核苷酸酶 96T
18699 26S PSM ELISA Kit 大鼠26S蛋白酶体 96T
18700 bFGF-6(Human basic fibroblast growth factor 6) ELISA Kit 人碱性成纤维细胞生长因子6 96T
18701 bFGF-4(Human basic fibroblast growth factor 4) ELISA Kit 人碱性成纤维细胞生长因子4 96T
18702 TIEG1 ELISA Kit 大鼠TGF-β诱导早期基因1 96T
18703 CD19(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD19分子 96T
18704 CD3(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD3分子 96T
18705 visfatin ELISA Kit 大鼠内脂素/内脏脂肪素 96T
18706 aFGF-1(Human acidic fibroblast growth factor 1) ELISA Kit 人酸性成纤维细胞生长因子1 96T
18707 TAP ELISA Kit 大鼠*原激活肽 96T
18708 CD4(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD4分子 96T
18709 FASL(Human Factor-related Apoptosis ligand) ELISA Kit 人凋亡相关因子配体 96T
18710 CD8(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD8分子 96T
18711 CFH ELISA Kit 大鼠补体因子H 96T
18712 FAS/CD95(Human Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 人凋亡相关因子 96T
18713 BTA ELISA Kit 大鼠膀胱肿瘤抗原 96T
18714 CD62E(Human E-Selectin) ELISA kit 人E选择素 96T
18715 CD25(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD25分子 96T
18716 CCL1(Human Eotaxin 1) ELISA Kit 人嗜酸粒细胞趋化蛋白 96T
18717 CD20(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD20分子 96T
18718 PDGF-BB ELISA Kit 大鼠血小板衍生生长因子BB 96T
18719 CD14(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD14分子 96T
18720 ECF(Human eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit 人鼠嗜酸粒细胞趋化因子 96T
18721 PP ELISA Kit 人白介素13(IL-13)ELISA试剂盒 大鼠* 96T
18722 EG-VEGF(Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor) ELISA Kit 人内分泌腺来源的血管内皮生长因子 96T
18723 NGF(Mouse Nerve growth factor) ELISA kit 小鼠神经生长因子 96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人白介素13(IL-13)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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