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上海纪宁酶联科技有限公司
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人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
18024 NF-KapB p65 (Rabbit nuclear factor-KapB p65) ELISA Kit 兔核因子κB亚基p65亲和肽 96T
18025 Mouse small nuclear ribonucleoprotein,snRNP/Sm ELISA Kit 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体 96T
18026 乙型肝炎二对半全套 96T
18027 CD3(Rat Cluster of differentiation 3,CD3) ELISA Kit 大鼠CD3分子 96T
18028 乙型肝炎二对半全套(立可读) 96T
18029 HBsAg 乙型肝炎表面抗原 96T
18030 HBsAb 乙型肝炎表面抗体 96T
18031 HBeAg 乙型肝炎e抗原 96T
18032 HBeAb 乙型肝炎e抗体 96T
18033 HBcAb 乙型肝炎核心抗体 96T
18034 HBsAg(立可读) 乙型肝炎表面抗原 96T
18035 HBsAb(立可读) 乙型肝炎表面抗体 96T
18036 HBeAg(立可读) 乙型肝炎e抗原 96T
18037 HBeAb(立可读) 乙型肝炎e抗体 96
18038 HBcAb(立可读) 乙型肝炎核心抗体 96T
18039 HBcAb(IgM) 乙型肝炎核心抗体 IgM 96T
18040 LH 促黄体生成素 96T
18041 FSH 促卵泡生成素 96T
18042 PLH 催乳素 96T
18043 P 孕酮 96T
18044 FT4 游离T4 96T
18045 T3 三碘甲状腺原氨酸(T3) 96T
18046 Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit 小鼠*/*蛋白磷酸酶 96T
18047 G-CSF (Rabbit Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 兔粒细胞集落刺激因子 96T
18048 JNK (Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK) ELISA Kit 大鼠c-Jun氨基末端激酶 96T
18049 Fc GammaR II /CD32(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR II ) ELISA Kit *G Fc段受体Ⅱ 96T
18050 MHC ELISA Kit 鱼类主要组织相容性复合体 96T
18051 T4 甲状腺素(T4) 96T
18052 TSH 人血清促甲状腺素(TSH) 96T
18053 Anti-TG 甲状腺球蛋白抗体(TG抗体) 96T
18054 Anti-TM 甲状腺微粒体抗体(TM抗体) 96T
18055 AFP 甲胎蛋白定量(一/二步夹心法) 96T
18056 AFP 甲胎蛋白定性 96T
18057 CEA 癌胚抗原定量 96T
18058 CEA 癌胚抗原定性(一/二步夹心法) 96T
18059 Ferritin 铁蛋白 96T
18060 Beta2-MG β2-微球蛋白 96T
18061 PSA 前列腺特异性抗原 96T
18062 CA50 上皮类癌相关抗原 96T
18063 CA125 卵巢癌相关抗原 96T
18064 CA153 乳腺癌相关抗原 96T
18065 CA199 胰腺癌相关抗原 96T
18066 CMV 巨细胞病毒 IgG(间接法二步法)
18067 CMV 巨细胞病毒 IgM(间接法二步法)
18068 CMV 巨细胞病毒 IgM(捕获法一步法)
18069 CMV IgM 巨细胞病毒 IgM(捕获法二步法)
18070 RV 风疹胞病毒 IgG(间接法二步法)
18071 RV IgM 风疹胞病毒 IgM(间接法二步法)
18072 RV IgM 风疹病毒 IgM(捕获法一步法)
18073 Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 小鼠乳酸脱氢酶 96T
18074 MHB(Rat Methemoglobin,MHB) ELISA Kit 大鼠高铁血红蛋白 96T
18075 Fc人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒 GammaR I /CD64(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR I ) ELISA Kit *G Fc段受体Ⅰ 96T
18076 C3 ELISA Kit 鲑鱼补体蛋白3 96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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