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上海纪宁酶联科技有限公司
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人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
17044 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 96T Felis catus; Feline (Cat)
17045 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 96T Chicken (Gallus)
17046 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 96T Cavia (Guinea pig )
17047 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 96T Homo sapiens (Human)
17048 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 96T Mus musculus (Mouse)
17049 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
17050 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17051 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
17052 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 96T Rhesus monkey (Simian)
17053 免疫球蛋白E(IgE)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin E (IgE) 96T Mus musculus (Mouse)
17054 免疫球蛋白A(IgA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin A (IgA) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
17055 免疫球蛋白A(IgA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin A (IgA) 96T Homo sapiens (Human)
17056 免疫球蛋白A(IgA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Immunoglobulin A (IgA) 96T Mus musculus (Mouse)
17057 血管细胞粘附分子1(VCAM1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM1) 96T Homo sapiens (Human)
17058 血管细胞粘附分子1(VCAM1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM1) 96T Mus musculus (Mouse)
17059 细胞间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 96T Homo sapiens (Human)
17060 细胞间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 96T Mus musculus (Mouse)
17061 细胞间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17062 碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2) 96T Homo sapiens (Human)
17063 组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 96T Homo sapiens (Human)
17064 组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 96T Mus musculus (Mouse)
17065 组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17066 基质金属蛋白酶9(MMP9)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) 96T Mus musculus (Mouse)
17067 表皮生长因子(EGF)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Epidermal Growth Factor (EGF) 96T Homo sapiens (Human)
17068 表皮生长因子(EGF)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Epidermal Growth Factor (EGF) 96T Mus musculus (Mouse)
17069 表皮生长因子(EGF)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Epidermal Growth Factor (EGF) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17070 白介素1β(IL1β)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b) 96T Homo sapiens (Human)
17071 白介素1β(IL1β)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b) 96T Mus musculus (Mouse)
17072 白介素1β(IL1β)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b) 96T Rattus norvegicus人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒 (Rat)
17073 P选择素(SELP)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Selectin, Plaet (SELP) 96T Homo sapiens (Human)
17074 P选择素(SELP)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Selectin, Plaet (SELP) 96T Mus musculus (Mouse)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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