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上海纪宁酶联科技有限公司
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鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
16283 无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16284 分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 2 (SFRP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16285 胃泌素释放肽(GRP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gastrin Releasing Peptide (GRP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16286 羟烷基*脱氢酶β(HADHβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hydroxyacyl Coenzyme A Dehydrogenase Beta (HADHb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16287 碳酸酐酶Ⅻ(CA12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carbonic Anhydrase XII (CA12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16288 细胞色素P450家族成员11A1(CYP11A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome P450 11A1 (CYP11A1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16289 周期素依赖性激酶6(CDK6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase 6 (CDK6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16290 肿瘤易感基因101(TSG101)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Susceptibility Gene 101 (TSG101) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16291 A类清道夫受体3(SCARA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Scavenger Receptor Class A Member 3 (SCARA3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16292 淀粉样前体蛋白(APP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Amyloid Precursor Protein (APP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16293 视紫质(RHO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rhodopsin (RHO) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16294 N-乙酰转移酶8样蛋白(NAT8L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 8 Like Protein (NAT8L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16295 腱蛋白样蛋白2(CHRDL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chordin Like Protein 2 (CHRDL2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16296 白介素4(IL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
16297 NADH脱氢酶1(ND1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for NADH Dehydrogenase 1 (ND1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16298 *氧化酶亚基Ⅲ(COX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome C Oxidase Subunit III (COX3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16299 脾脏*激酶(SYK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Spleen Tyrosine Kinase (SYK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16300 黑色素聚集激素受体1(MCHR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Melanin Concentrating Hormone Receptor 1 (MCHR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16301 δ样蛋白1同源物(δLK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Delta Like 1 Homolog (dLK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16302 重肽铁蛋白(FTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferritin, Heavy Polypeptide (FTH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16303 线粒体铁蛋白(FTMT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferritin, Mitochondrial (FTMT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16304 二价金属转运蛋白1(DMT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Divalent Metal Transporter 1 (DMT1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16305 铁反应元件结合蛋白2(IREB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Iron Responsive Element Binding Protein 2 (IREB2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16306 顺乌头酸酶1(ACO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aconitase 1 (ACO1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16307 蛋白酶激活受体1(PAR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protease Activated Receptor 1 (PAR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16308 *半*连接酶催化亚基(GCLC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamate Cysteine Ligase, Catalytic (GCLC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16309 Mg2+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Phosphatase, Mg2+/Mn2+ Dependent 1A (PPM1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16310 Mg2+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Phosphatase, Mg2+/Mn2+ Dependent 1A (PPM1A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16311 组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 1 (HDAC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16312 *1β(MEP1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Meprin A Beta (MEP1b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16313 Bcl2关联X蛋白(Bax)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bcl2 Associated X Protein (Bax) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16314 血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 2 (ANGPTL2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16315 抗肌萎缩蛋白(UTRN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Utrophin (UTRN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16316 钠/钾离子转运ATP酶β4肽(ATP1β4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16317 UDP葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for UDP Glucose Ceramide Glucosyltransferase (UGCG) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16318 半*丰富血管生成诱导因子61(CYR61)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61 (CYR61) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16319 UDP葡糖醛酸基转移酶1家族多肽A1(UGT1A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for UDP Glucuronosyltransferase 1 Family, Polypeptide A1 (UGT1A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16320 视网膜血管瘤肿瘤抑制因子(vHL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Von Hippel Lindau Tumor Suppressor (vHL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16321 细胞色素P450家族成员2B6(CYP2B6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome P450 2B6 (CYP2B6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16322 锚定蛋白重复域蛋白1(ANKRD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ankyrin Repeat Domain Protein 1 (ANKRD1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16323 角蛋白18(KRT18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 18 (KRT18) 48T/96T Mus musculus 鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒(Mouse)
16324 雌激素受体β(ERβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Estrogen Receptor Beta (ERb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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