植物25羟基*3（25（OH）D3/25 HVD3）ELISA试剂盒

植物25羟基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在植物25羟基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

16107 生长分化因子3(GDF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16108 生长分化因子1(GDF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16109 生长分化因子1(GDF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16110 干扰素诱导T-细胞α亚族趋化剂(ITαC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16111 干扰素诱导T-细胞α亚族趋化剂(ITαC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16112 VEGF共调节趋化因子1(VCC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16113 VEGF共调节趋化因子1(VCC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16114 白细胞介素24(IL24)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 24 (IL24) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16115 神经元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin II (NPTX2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16116 羧肽酶N1(CPN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carboxypeptidase N1 (CPN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16117 缓激肽受体B2(BDKRB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bradykinin Receptor B2 (BDKRB2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16118 含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Zinc Finger, BED Type Containing Protein 3 (ZBED3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16119 白细胞弹性蛋白酶抑制因子(LEI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leukocyte Elastase Inhibitor (LEI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16120 骨桥素(OPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osteopontin (OPN) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16121 天冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aspartate Aminotransferase (AST) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16122 蛋白激酶Bβ(PKBβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase B Beta (PKBb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16123 帕金森氏病蛋白2(PARK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parkinson Disease Protein 2 (PARK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16124 钙蛋白酶2(CAPN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpain 2, Large Subunit (CAPN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16125 内切核酸酶G(ENDOG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endonuclease G, Mitochondrial (ENDOG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16126 甲基CpG结合蛋白2(MECP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Methyl CpG Binding Protein 2 (MECP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16127 Apelin 17蛋白(AP17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apelin 17 (AP17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16128 小亚基钙蛋白酶1(CAPNS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpain, Small Subunit 1 (CAPNS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16129 *棕榈酰转移酶长链碱性亚基3(SPTLC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serine Palmitoyltransferase, Long Chain Base Subunit 3 (SPTLC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16130 血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiotensin I (AngI) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
16131 肝型脂肪酸结合蛋白(FABP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 1, Liver (FABP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16132 载脂蛋白A4(APOA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apolipoprotein A4 (APOA4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16133 多聚蛋白1(MMRN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Multimerin 1 (MMRN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16134 磷脂转运蛋白(PLTP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipid Transfer Protein (PLTP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16135 羧肽酶N2(CPN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carboxypeptidase N2 (CPN2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16136 谷光甘肽合成酶(GSS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione Synthetase (GSS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16137 Egl Nine同源物1(EGLN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Egl Nine Homolog 1 (EGLN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16138 眼小畸形关联转录因子(MITF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Microphthalmia Associated Transcription Factor (MITF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16139 溶血*酰基转移酶1(LPCAT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 1 (LPCAT1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16140 溶血*酰基转移酶2(LPCAT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 2 (LPCAT2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16141 溶血*酰基转移酶3(LPCAT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 3 (LPCAT3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16142 溶血*酰基转移酶4(LPCAT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 4 (LPCAT4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16143 泛素蛋白连接酶E3成分N-识别蛋白4(UBR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin Protein Ligase E3 Component N-Recognin 4 (UBR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16144 非ATP酶蛋白酶体26S亚基10(PSMD10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 10 (PSMD10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16145 肝配蛋白A受体3(EPHA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ephrin Type A Receptor 3 (EPHA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16146 含杆状病毒IAP重复蛋白6(BIRC6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Baculoviral IAP Repeat Containing Protein 6 (BIRC6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16147 非红细胞血影蛋白β4(SPTβN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Spectrin Beta, Non Erythrocytic 4 (SPTbN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16148 生长激素促分泌素受体(GHSR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Hormone Secretagogue Receptor (GHSR) 48T/96T Homo sapiens植物25羟基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 (Human)
16149 肌红蛋白(MYO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myoglobin (MYO) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5植物25羟基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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