小鼠酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA试剂盒科研
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上海纪宁酶联科技有限公司
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菜豆凝集素(PHA)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
菜豆凝集素(PHA)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在菜豆凝集素(PHA)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
15475 突触融合蛋白6(STX6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 6 (STX6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15476 突触融合蛋白7(STX7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 7 (STX7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15477 突触融合蛋白8(STX8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 8 (STX8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15478 突触融合蛋白1B(STX1B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 1B (STX1B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15479 突触融合蛋白10(STX10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 10 (STX10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15480 突触融合蛋白11(STX11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 11 (STX11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15481 突触融合蛋白12(STX12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 12 (STX12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15482 突触融合蛋白16(STX16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 16 (STX16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15483 突触融合蛋白17(STX17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 17 (STX17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15484 突触融合蛋白18(STX18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 18 (STX18) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15485 Surfeit 2蛋白(SURF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfeit 2 (SURF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15486 Surfeit 3蛋白(SURF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfeit 3 (SURF3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15487 Surfeit 4蛋白(SURF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfeit 4 (SURF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15488 Surfeit 6蛋白(SURF6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfeit 6 (SURF6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15489 突触回蛋白4(SYNGR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synaptogyrin 4 (SYNGR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15490 突触回蛋白2(SYNGR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synaptogyrin 2 (SYNGR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15491 突触回蛋白3(SYNGR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synaptogyrin 3 (SYNGR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15492 硒磷酸合成酶2(SEPHS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Selenophosphate Synthetase 2 (SEPHS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15493 胞浆磷蛋白2(STMN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stathmin 2 (STMN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15494 胞浆磷蛋白3(STMN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stathmin 3 (STMN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15495 Nesprin 2蛋白(Nesp2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nesprin 2 (Nesp2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15496 Nesprin 1蛋白(Nesp1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nesprin 1 (Nesp1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15497 抗肌萎缩蛋白(UTRN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Utrophin (UTRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15498 动力蛋白激活蛋白1(DCTN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dynactin 1 (DCTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15499 动力蛋白激活蛋白3(DCTN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dynactin 3 (DCTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15500 动力蛋白激活蛋白4(DCTN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dynactin 4 (DCTN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15501 动力蛋白激活蛋白5(DCTN5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dynactin 5 (DCTN5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15502 动力蛋白激活蛋白6(DCTN6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dynactin 6 (DCTN6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15503 网状蛋白4受体(RTN4R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Reticulon 4 Receptor (RTN4R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15504 网状蛋白2(RTN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Reticulon 2 (RTN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15505 网状蛋白3(RTN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Reticulon 3 (RTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15506 网状蛋白4(RTN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Reticulon 4 (RTN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15507 神经肽B(NPB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropeptide B (NPB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15508 *受体2(SSTR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Somatostatin Receptor 2 (SSTR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15509 *受体3(SSTR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Somatostatin Receptor 3 (SSTR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15510 *受体4(SSTR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Somatostatin Receptor 4 (SSTR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15511 *受体5(SSTR5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Somatostatin Receptor 5 (SSTR5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15512 视蛋白5(OPN5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Opsin 5 (OPN5) 48T/96T Homo sapiens 菜豆凝集素(PHA)ELISA试剂盒(Human)
15513 视蛋白4(OPN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Opsin 4 (OPN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5菜豆凝集素(PHA)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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