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上海纪宁酶联科技有限公司
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植物吲哚乙酸(IAA) ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
植物吲哚乙酸(IAA) ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在植物吲哚乙酸(IAA) ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
15229 白介素22受体(IL2R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 22 Receptor (IL22R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15230 膜联蛋白A9(ANXA9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A9 (ANXA9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15231 膜联蛋白A10(ANXA10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A10 (ANXA10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15232 膜联蛋白A7(ANXA7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A7 (ANXA7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15233 膜联蛋白A13(ANXA13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A13 (ANXA13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15234 膜联蛋白A8(ANXA8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A8 (ANXA8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15235 Pannexin 1蛋白(PANX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pannexin 1 (PANX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15236 Pannexin 2蛋白(PANX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pannexin 2 (PANX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15237 Pannexin 3蛋白(PANX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pannexin 3 (PANX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15238 白介素1ζ(IL1ζ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Zeta (IL1z) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15239 白介素1ε(IL1ε)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Epsilon (IL1e) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15240 脱氧核糖核酸酶Ⅹ(DNASEⅩ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease X (DNASEX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15241 乙醇脱氢酶2(ADH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alcohol Dehydrogenase 2 (ADH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15242 乙醇脱氢酶3(ADH3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alcohol Dehydrogenase 3 (ADH3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15243 乙醇脱氢酶4(ADH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alcohol Dehydrogenase 4 (ADH4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15244 乙醇脱氢酶5(ADH5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alcohol Dehydrogenase 5 (ADH5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15245 乙醇脱氢酶6(ADH6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alcohol Dehydrogenase 6 (ADH6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15246 乙醇脱氢酶7(ADH7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alcohol Dehydrogenase 7 (ADH7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15247 分拣连接蛋白2(SNX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 2 (SNX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15248 分拣连接蛋白3(SNX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 3 (SNX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15249 分拣连接蛋白4(SNX4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 4 (SNX4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15250 分拣连接蛋白5(SNX5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 5 (SNX5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15251 分拣连接蛋白6(SNX6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 6 (SNX6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15252 分拣连接蛋白19(SNX19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 19 (SNX19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15253 分拣连接蛋白9(SNX9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 9 (SNX9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15254 分拣连接蛋白8(SNX8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 8 (SNX8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15255 分拣连接蛋白15(SNX15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 15 (SNX15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15256 分拣连接蛋白1(SNX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sorting Nexin 1 (SNX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15257 连环蛋白α2(CTNNα2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Catenin Alpha 2 (CTNNa2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15258 连环蛋白α3(CTNNα3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Catenin Alpha 3 (CTNNa3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15259 连环蛋白δ1(CTNNδ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Catenin Delta 1 (CTNNd1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15260 连环蛋白δ2(CTNNδ2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Catenin Delta 2 (CTNNd2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15261 组蛋白脱乙酰基酶3(HDAC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 3 (HDAC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15262 组蛋白脱乙酰基酶4(HDAC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 4 (HDAC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15263 组蛋白脱乙酰基酶5(HDAC5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 5 (HDAC5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15264 组蛋白脱乙酰基酶7(HDAC7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 7 (HDAC7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15265 组蛋白脱乙酰基酶8(HDAC8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 8 (HDAC8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15266 组蛋白脱乙酰基酶9(HDAC9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 9 (HDAC9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15267 组蛋白脱乙酰基酶10(HDAC10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 10 (HDAC10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15268 组蛋白脱乙酰基酶11(HDAC11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 11 (HDAC11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15269 沉默调节蛋白3(SIRT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sirtuin 3 (SIRT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15270 沉默调节蛋白5(SIRT5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sirtuin 5 (SIRT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15271 沉默调节蛋白7(SIRT7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sirtuin 7 (SIRT7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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