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上海纪宁酶联科技有限公司
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伪狂犬病毒gE2.0抗体ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
伪狂犬病毒gE2.0抗体ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在伪狂犬病毒gE2.0抗体ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
14859 网状蛋白1(RTN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Reticulon 1 (RTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14860 氧桥二十烷受体1(OXER1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oxoeicosanoid Receptor 1 (OXER1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14861 环前列腺素受体(PTGIR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prostacyclin Receptor (PTGIR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14862 盖膜蛋白β(TECTβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tectorin Beta (TECTb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14863 窖蛋白2(CAV2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caveolin 2 (CAV2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14864 窖蛋白3(CAV3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caveolin 3 (CAV3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14865 钙蛋白酶3(CAPN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpain 3 (CAPN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14866 钙蛋白酶5(CAPN5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpain 5 (CAPN5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14867 钙蛋白酶9(CAPN9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpain 9 (CAPN9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14868 钙蛋白酶10(CAPN10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpain 10 (CAPN10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14869 组织蛋白酶H(CTSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin H (CTSH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14870 组织蛋白酶F(CTSF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin F (CTSF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14871 组织蛋白酶W(CTSW)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin W (CTSW) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14872 组织蛋白酶V(CTSV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin V (CTSV) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14873 补体成分6(C6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 6 (C6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14874 *过氧化酶4(GPX4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 4 (GPX4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14875 水通道蛋白7(AQP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aquaporin 7 (AQP7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14876 兰尼定受体3(RYR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ryanodine Receptor 3 (RYR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14877 三合蛋白(TRDN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Triadin (TRDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14878 突触融合蛋白3(STX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 3 (STX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14879 免疫球蛋白κ(Igκ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin Kappa (Igk) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14880 免疫球蛋白J链(IgJ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin J (IgJ) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14881 Apelin蛋白(APLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apelin (APLN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14882 Apelin受体(APLNR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apelin Receptor (APLNR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14883 血红蛋白α1(HBα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin Alpha 1 (HBa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14884 血红蛋白ζ(HBζ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin Zeta (HBz) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14885 血红蛋白δ(HBδ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin Delta (HBd) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14886 血红蛋白γ1(HBγ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin Gamma 1 (HBg1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14887 血红蛋白ε1(HBε1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin Epsilon 1 (HBe1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14888 血红蛋白γ2(HBγ2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin Gamma 2 (HBg2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14889 血红蛋白α2(HBα2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin Alpha 2 (HBa2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14890 血红蛋白θ1(HBθ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin Theta 1 (HBq1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14891 血红蛋白β(HBβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin Beta (HBb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14892 磷脂爬行酶5(PLSCR5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipid Scramblase 5 (PLSCR5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14893 糖蛋白M6B(GPM6B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycoprotein M6B (GPM6B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14894 嗅素2(OLFM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Olfactomedin 2 (OLFM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14895 嗅素1(OLFM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Olfactomedin 1 (OLFM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14896 突触蛋白Ⅱ(SYN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synapsin II (SYN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14897 突触蛋白Ⅲ(SYN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synapsin III (SYN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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