口蹄疫非结构蛋白抗体ELISA试剂盒

口蹄疫非结构蛋白抗体ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在口蹄疫非结构蛋白抗体ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

14775 核仁蛋白1()检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleolar Protein 1 () 48T/96T Homo sapiens (Human)
14776 神经丝束蛋白(NPTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuroplastin (NPTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14777 轴突蛋白1(NRXN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurexin 1 (NRXN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14778 神经纤维素1(NF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurofibromin 1 (NF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14779 神经降压素受体2(NTSR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurotensin Receptor 2 (NTSR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14780 *受体1(NIACR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Niacin Receptor 1 (NIACR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14781 Nibrin蛋白(NBN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nibrin (NBN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14782 Nicastrin蛋白(NCSTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nicastrin (NCSTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14783 *转运蛋白(NET)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Norepinephrine Transporter (NET) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14784 孤菲肽受体(NOCIR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nociceptin Receptor (NOCIR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14785 核苷磷酸化酶(NP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoside Phosphorylase (NP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14786 嗅素3(OLFM3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Olfactomedin 3 (OLFM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14787 寡膈蛋白1(OPHN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oligophrenin 1 (OPHN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14788 旋光蛋白(OPTC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Opticin (OPTC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14789 骨肉瘤放大基因9(OS9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osteosarcoma Amplified 9 (OS9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14790 耳畸蛋白(OTOF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Otoferlin (OTOF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14791 耳纤维细胞源性蛋白(OTOR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Otoraplin (OTOR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14792 输卵管糖蛋白1(OVGP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oviductal Glycoprotein 1 (OVGP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14793 视神经萎缩蛋白3(OPA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Optic Atrophy 3 (OPA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14794 视神经病变诱导反应蛋白(OPTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Optineurin (OPTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14795 Anoctamin 2蛋白(ANO2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anoctamin 2 (ANO2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14796 Paralemmin蛋白(PALM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Paralemmin (PALM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14797 泛酸激酶1(PANK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pantothenate Kinase 1 (PANK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14798 中心粒外周物质1(PCM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pericentriolar Material 1 (PCM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14799 中心粒旁素(PCNT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pericentrin (PCNT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14800 葡萄糖磷酸变位酶1(PGM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphoglucomutase 1 (PGM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14801 磷酸甘露糖酶1(PMM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphomannomutase 1 (PMM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14802 蛋白O-甘露糖基转移酶1(POMT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein O-Mannosyltransferase 1 (POMT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14803 脉周蛋白1(PPHLN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Periphilin 1 (PPHLN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14804 磷酸*性磷酸酶(PSPH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphoserine Phosphatase (PSPH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14805 假尿苷酸合酶1(PUS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pseudouridylate Synthase 1 (PUS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14806 外周蛋白2(PRPH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peripherin 2 (PRPH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14807 光导蛋白(PDC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosducin (PDC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14808 网蛋白(PLEC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plectin (PLEC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14809 磷脂酰肌醇蛋白聚糖6(GPC6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glypican 6 (GPC6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14810 钙调素(RGN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Regucalcin (RGN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14811 核糖体结合糖蛋白Ⅰ(RPN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribophorin I (RPN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14812 Rhotekin蛋白(RTKN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rhotekin (RTKN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14813 根蛋白(RDX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Radixin (RDX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14814 视紫质(RHO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rhodopsin (RHO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14815 速激肽1(TAC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tachykinin, Precursor 1 (TAC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14816 盖膜蛋白α(TECTα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tectorin Alpha (TECTa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14817 易位蛋白1(TLOC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Translocation Protein 1 (TLOC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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