猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒

猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在猪瘟病毒抗体ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

14735 Frataxin蛋白(FXN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Frataxin (FXN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14736 粒钙蛋白(GCA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Grancalcin (GCA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14737 血型糖蛋白E(GYPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycophorin E (GYPE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14738 甘丙肽受体1(GALR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Galanin Receptor 1 (GALR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14739 联会蛋白(GMNN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Geminin (GMNN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14740 胰高血糖素受体(GCGR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucagon Receptor (GCGR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14741 透明质酸合酶1(HAS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hyaluronan Synthase 1 (HAS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14742 半椎蛋白1(HMCN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemicentin 1 (HMCN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14743 唾液富组蛋白3(HTN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histatin 3 (HTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14744 Inversin蛋白(INVS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inversin (INVS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14745 *三磷酸酶(ITPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inosine Triphosphatase (ITPA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14746 Intersectin 1蛋白(ITSN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intersectin 1 (ITSN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14747 连接蛋白1(JPH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Junctophilin 1 (JPH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14748 Janus激酶1(JAK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Janus Kinase 1 (JAK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14749 驱动蛋白2(KNS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kinesin 2 (KNS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14750 亲核素α3(KPNα3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Karyopherin Alpha 3 (KPNa3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14751 驱动结合蛋白1(KTN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kinectin 1 (KTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14752 吻素1(KISS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kisspeptin 1 (KISS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14753 Ladinin 1蛋白(LAD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ladinin 1 (LAD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14754 蛛毒素受体1(LPHN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Latrophilin 1 (LPHN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14755 Leupaxin蛋白(LPXN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leupaxin (LPXN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14756 溶血磷脂酶Ⅰ(LYPLA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysophospholipase I (LYPLA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14757 脲酰丙酸酶β(UPβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ureidopropionase Beta (UPb1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14758 尿溶蛋白1A(UPK1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Uroplakin 1A (UPK1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14759 犁鼻1受体1(VN1R1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vomeronasal 1 Receptor 1 (VN1R1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14760 木糖基转移酶Ⅱ(XYLT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Xylosyltransferase II (XYLT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14761 家族性地中海热基因(MEFV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mediterranean Fever (MEFV) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14762 线粒体融合素1(MFN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mitofusin 1 (MFN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14763 Midline 1蛋白(MID1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Midline 1 (MID1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14764 巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (MPST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14765 肌蛋白(MSC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Musculin (MSC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14766 Metaxin 1蛋白(MTX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Metaxin 1 (MTX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14767 黑素皮质激素3受体(MC3R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Melanocortin 3 Receptor (MC3R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14768 肌收缩蛋白(MYOT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myotilin (MYOT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14769 肌微管素1(MTM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myotubularin 1 (MTM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14770 神经元导向因子1(NAV1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuron Navigator 1 (NAV1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14771 神经软骨蛋白(NCDN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurochondrin (NCDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14772 Ninein蛋白(NIN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ninein (NIN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14773 神经连接蛋白1(NLGN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuroligin 1 (NLGN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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