荷兰赛迪口蹄疫0型2板ELISA试剂盒

荷兰赛迪口蹄疫0型2板ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在荷兰赛迪口蹄疫0型2板ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

14693 B-细胞淋巴瘤因子10(Bcl10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for B-Cell CLL/Lymphoma 10 (Bcl10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14694 碱核蛋白1(BNC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Basonuclin 1 (BNC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14695 布皮质素1(BEST1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bestrophin 1 (BEST1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14696 胱天蛋白酶6(CASP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase 6 (CASP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14697 突触核蛋白β(SNCβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synuclein Beta (SNCb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14698 钙营养蛋白1(CALN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calneuron 1 (CALN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14699 羰基还原酶1(CBR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carbonyl Reductase 1 (CBR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14700 细胞周期素F(CCNF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin F (CCNF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14701 胞苷脱氨酶(CDA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytidine Deaminase (CDA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14702 羧酸酯酶1(CES1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carboxylesterase 1 (CES1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14703 软骨凝集蛋白(CHODL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chondrolectin (CHODL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14704 糖合酶1(CHSY1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carbohydrate Synthase 1 (CHSY1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14705 网格蛋白交互子1(CLINT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Clathrin Interactor 1 (CLINT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14706 *稳定蛋白(CORT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cortistatin (CORT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14707 羧肽酶M(CPM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carboxypeptidase M (CPM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14708 复合素1(CPLX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complexin 1 (CPLX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14709 肉毒碱乙酰转移酶(CRAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carnitine Acetyltransferase (CRAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14710 肉毒碱-O-甲基转移酶(CORT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carnitine-O-Octanoyltransferase (CORT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14711 肘臀蛋白(CUBN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cubilin (CUBN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14712 Cullin 1蛋白(CUL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cullin 1 (CUL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14713 降钙素受体(CTR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calcitonin Receptor (CTR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14714 钙联接蛋白(CLGN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calmegin (CLGN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14715 钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpastatin (CAST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14716 嵌合蛋白2(CHN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chimerin 2 (CHN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14717 Cylindromatosis蛋白(CYLD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cylindromatosis (CYLD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14718 细胞球蛋白(CYGB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytoglobin (CYGB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14719 停靠蛋白1(DOK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Docking Protein 1 (DOK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14720 异连蛋白α(DTNα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dystrobrevin Alpha (DTNa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14721 Dymeclin蛋白(DYM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dymeclin (DYM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14722 双氧化酶1(DUOX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dual Oxidase 1 (DUOX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14723 角化不良蛋白(DKC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dyskerin (DKC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14724 Dystonin蛋白(DST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dystonin (DST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14725 外异蛋白A(EDA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ectodysplasin A (EDA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14726 内粘蛋白(EMCN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endomucin (EMCN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14727 Enamelin蛋白(ENAM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Enamelin (ENAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14728 内磺肽α(ENSα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endosulfine Alpha (ENSa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14729 内皮素3(EDN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelin 3 (EDN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14730 核酸外切酶1(EXO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exonuclease 1 (EXO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14731 纤维化蛋白(FBS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrosin (FBS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14732 铁氧还蛋白1(FDX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferredoxin 1 (FDX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14733 脂筏特征蛋白2(FLOT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Flotillin 2 (FLOT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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