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上海纪宁酶联科技有限公司
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苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
14571 血管紧张素1-9(Ang1-9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiotensin 1-9 (Ang1-9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14572 半乳糖凝集素9B(GAL9B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Galectin 9B (GAL9B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14573 Sesquipedalian 1蛋白(Ses1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sesquipedalian 1 (Ses1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14574 *蛋白酶31(PRSS31)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protease, Serine 31 (PRSS31) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14575 半乳糖凝集素9C(GAL9C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Galectin 9C (GAL9C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14576 耳石蛋白1(OTOL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Otolin 1 (OTOL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14577 半乳糖凝集素7B(GAL7B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Galectin 7B (GAL7B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14578 封闭蛋白25(CLDN25)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 25 (CLDN25) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14579 干扰素α2(IFNα2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Alpha 2 (IFNa2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14580 核糖核酸酶P(RNASEP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease P (RNASEP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14581 核糖核酸酶H(RNASEH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease H (RNASEH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14582 输入蛋白8(IPO8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Importin 8 (IPO8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14583 酪胺酸酶(TYR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tyrosinase (TYR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14584 Nischarin蛋白(NISCH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nischarin (NISCH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14585 眼皮肤白化病Ⅱ蛋白(OCA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oculocutaneous Albinism II (OCA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14586 转换蛋白1(TNP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transition Protein 1 (TNP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14587 蛛毒素受体3(LPHN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Latrophilin 3 (LPHN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14588 下丘泌素受体2(HCRTR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hypocretin Receptor 2 (HCRTR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14589 下丘泌素受体1(HCRTR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hypocretin Receptor 1 (HCRTR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14590 食欲素(OX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Orexin (OX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14591 组织蛋白酶A(CTSA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin A (CTSA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14592 蛛毒素受体2(LPHN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Latrophilin 2 (LPHN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14593 *受体1(SSTR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Somatostatin Receptor 1 (SSTR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14594 突触素(SYP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synaptophysin (SYP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14595 滋养层特异性糖蛋白(TPBG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trophoblast Glycoprotein (TPBG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14596 桥粒芯糖蛋白3(DSG3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Desmoglein 3 (DSG3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14597 血小板亲和蛋白2(PKP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plakophilin 2 (PKP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14598 盐皮质激素受体(MR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mineralocorticoid Receptor (MR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14599 角蛋白6B(KRT6B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 6B (KRT6B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14600 角蛋白5(KRT5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 5 (KRT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14601 角蛋白3(KRT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 3 (KRT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14602 蜗管蛋白(COIL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coilin (COIL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14603 角蛋白15(KRT15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 15 (KRT15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14604 角蛋白12(KRT12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 12 (KRT12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14605 角蛋白7(KRT7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 7 (KRT7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14606 ADP核糖转移酶4(ART4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ADP Ribosyltransferase 4 (ART4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14607 拓扑异构酶Ⅱ(TOP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Topoisomerase II (TOP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14608 谷氨氨肽酶(GluAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamyl Aminopeptidase (GluAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14609 前-B-淋巴细胞基因1(VPREB1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pre-B-Lymphocyte Gene 1 (VPREB1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14610 岩藻糖基转移酶3(FUT3)苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)ELISA试剂盒检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fucosyltransferase 3 (FUT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14611 矢车菊苷α1(CENTα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Centaurin Alpha 1 (CENTa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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