大肠杆菌宿主残留蛋白（E.coli P）ELISA试剂盒

大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coli P)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coli P)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

14491 Misato同源物1(MSTO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Misato Homolog 1 (MSTO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14492 腈水解酶2(NIT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nitrilase 2 (NIT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14493 核仁蛋白58(NOP58)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleolar protein 58 (NOP58) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14494 仙人掌素(Cactin)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cactin 48T/96T Homo sapiens (Human)
14495 胰安肽(Aglycin)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aglycin 48T/96T Homo sapiens (Human)
14496 血管紧张素1-7(Ang1-7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14497 透明质酸氨基葡糖苷酶1(HYAL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hyaluronoglucosaminidase 1 (HYAL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14498 RPE脊椎蛋白(RPESP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for RPE Spondin (RPESP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14499 Sarcosynapsin蛋白(SRYP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sarcosynapsin (SRYP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14500 Shisa同源物5(SHISA5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Shisa Homolog 5 (SHISA5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14501 分离蛋白2(SCRN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secernin 2 (SCRN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14502 分离蛋白3(SCRN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secernin 3 (SCRN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14503 信号素3G(SEMA3G)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Semaphorin 3G (SEMA3G) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14504 磷脂酶D6(PLD6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase D6 (PLD6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14505 Embigin蛋白(EMB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Embigin (EMB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14506 核糖核酸外切酶2(ERI2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exoribonuclease 2 (ERI2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14507 筑丝蛋白4(TEKT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tektin 4 (TEKT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14508 皮质素2(CTXN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cortexin 2 (CTXN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14509 皮质素3(CTXN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cortexin 3 (CTXN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14510 防御素β133(DEFβ133)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 133 (DEFb133) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14511 葡糖酸激酶(GNTK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gluconate Kinase (GNTK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14512 烯醇化酶4(ENO4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Enolase 4 (ENO4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14513 YY肽3(PYY3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peptide YY 3 (PYY3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14514 Ropporin 1B蛋白(ROPN1B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ropporin 1B (ROPN1B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14515 线粒体GTP酶1(MTG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mitochondrial GTPase 1 (MTG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14516 *组合因子4(SERINC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serine Incorporator 4 (SERINC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14517 3-羟基丁酸脱氢酶2(BDH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 3-Hydroxybutyrate Dehydrogenase 2 (BDH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14518 寡糖转移酶4(OST4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oligosaccharyltransferase 4 (OST4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14519 失调蛋白8(ATXN8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ataxin 8 (ATXN8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14520 *过氧化酶8(GPX8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 8 (GPX8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14521 Paralemmin 3蛋白(PALM3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Paralemmin 3 (PALM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14522 丝聚蛋白2(FLG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Filaggrin 2 (FLG2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14523 脂质运载蛋白15(LCN15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipocalin 15 (LCN15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14524 防御素β132(DEFβ132)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 132 (DEFb132) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14525 L-天冬氨酸脱氢酶(ASPDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for L-Aspartate Dehydrogenase (ASPDH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14526 Clarin 2蛋白(CLRN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Clarin 2 (CLRN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14527 癌调蛋白2(OCM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oncomodulin 2 (OCM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14528 双调蛋白B(AREGB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Amphiregulin B (AREGB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14529 封闭蛋白24(CLDN24)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 24 (CLDN24) 48T/96T Homo sapiens大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coli P)ELISA试剂盒 (Human)
14530 脂肪酸转移酶2(LIPT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipoyltransferase 2 (LIPT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14531 RIO激酶2(RIOK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for RIO Kinase 2 (RIOK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coli P)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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