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上海纪宁酶联科技有限公司
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α-银环蛇毒素(α-BGT)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
α-银环蛇毒素(α-BGT)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在α-银环蛇毒素(α-BGT)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
14450 Metaxin 3蛋白(MTX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Metaxin 3 (MTX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14451 轴突生长诱向因子5(Ntn5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Netrin 5 (Ntn5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14452 假尿苷酸合酶3(PUS3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pseudouridylate Synthase 3 (PUS3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14453 Anoctamin 10蛋白(ANO10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anoctamin 10 (ANO10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14454 Akirin 1蛋白(AKIRIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Akirin 1 (AKIRIN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14455 Tectonic 2蛋白(TCTN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tectonic 2 (TCTN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14456 N-α-乙酰转移酶40(NαA40)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Alpha-Acetyltransferase 40 (NaA40) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14457 核仁蛋白10(0)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleolar Protein 10 (0) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14458 N-乙酰转移酶15(NAT15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 15 (NAT15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14459 羰基还原酶4(CBR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carbonyl Reductase 4 (CBR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14460 肌醇单磷酸酶3(IMPA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inositol Monophosphatase 3 (IMPA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14461 假尿苷酸合酶7(PUS7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pseudouridylate Synthase 7 (PUS7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14462 肌球蛋白ⅩⅨ(MYO19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin XIX (MYO19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14463 核仁蛋白9(NOL9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleolar Protein 9 (NOL9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14464 Raftlin 2蛋白(RFTN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Raftlin 2 (RFTN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14465 羧酸酯酶5A(CES5A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carboxylesterase 5A (CES5A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14466 腺苷酸激酶8(AK8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adenylate Kinase 8 (AK8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14467 筑丝蛋白5(TEKT5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tektin 5 (TEKT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14468 肌间蛋白3(MYOM3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myomesin 3 (MYOM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14469 羧酸酯酶4A(CES4A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carboxylesterase 4A (CES4A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14470 磷脂酶D5(PLD5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase D5 (PLD5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14471 羟基丙酮酸异构酶(HYI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hydroxypyruvate Isomerase (HYI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14472 甘油磷酸*磷酸二酯酶(GPCPD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycerophosphocholine Phosphodiesterase (GPCPD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14473 羧肽酶X2(CPX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carboxypeptidase X2 (CPX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14474 纺锤体蛋白4(SPIN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Spindlin 4 (SPIN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14475 纺锤体蛋白3(SPIN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Spindlin 3 (SPIN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14476 Fritz蛋白(FRTZ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fritz (FRTZ) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14477 古梅斯蛋白2(AMZ2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Archaemetzincin 2 (AMZ2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14478 X-脯氨酰氨肽酶3(XPNPEP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for X-Prolyl Aminopeptidase 3 (XPNPEP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14479 N-α-乙酰转移酶11(NαA11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Alpha-Acetyltransferase 11 (NaA11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14480 皂素(Haponin)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Haponin 48T/96T Homo sapiens (Human)
14481 孤儿素磷酸酶2(PHOSPHO2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphatase, Orphan 2 (PHOSPHO2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14482 核仁蛋白12(2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleolar Protein 12 (2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14483 甘油激酶5(GK5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycerol Kinase 5 (GK5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14484 磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphoglycerate Mutase 5 (PGAM5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14485 93kDa核孔蛋白(NUP93)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 93kDa (NUP93) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14486 ATM交互子(ATMIN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ATM Interactor (ATMIN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14487 Limkainβ1蛋白(LKAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Limkain b1 (LKAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14488 Marapsin 2蛋白(MPN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Marapsin 2 (MPN2) 48T/96T Homo sapiensα-银环蛇毒素(α-BGT)ELISA试剂盒 (Human)
14489 *脱氢酶15(RDH15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 16 (RDH16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14490 Penguin蛋白(PEN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Penguin (PEN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5α-银环蛇毒素(α-BGT)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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