蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原（vtg）ELISA试剂盒

蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原（vtg)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原（vtg)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

14331 G抗原3(GAGE3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for G Antigen 3 (GAGE3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14332 磷酸*(Php)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphohippolin(Php) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14333 Rabconnectin 3蛋白(RC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rabconnectin 3 (RC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14334 接触蛋白6(CNTN6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Contactin 6 (CNTN6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14335 接触蛋白5(CNTN5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Contactin 5 (CNTN5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14336 封闭蛋白19(CLDN19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 19 (CLDN19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14337 Codanin 1蛋白(CDAN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Codanin 1 (CDAN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14338 钙结合蛋白3(CALB3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calbindin 3 (CALB3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14339 含钙通道Flower域蛋白(CACFD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calcium Channel Flower Domain Containing Protein 1 (CACFD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14340 耦合因子6(CF6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coupling Factor 6 (CF6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14341 乙醛氧化酶1(AOX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aldehyde Oxidase 1 (AOX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14342 二氢二醇脱氢酶2(DDH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dihydrodiol Dehydrogenase 2 (DDH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14343 细胞周期素M4(CCNM4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin M4 (CNNM4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14344 细胞周期素M1(CCNM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin M1 (CNNM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14345 细胞周期素M2(CCNM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin M2 (CNNM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14346 细胞周期素M3(CCNM3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin M3 (CNNM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14347 氨肽酶O(APO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aminopeptidase O (APO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14348 钙蛋白酶8(CAPN8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpain 8 (CAPN8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14349 封闭蛋白10(CLDN10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 10 (CLDN10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14350 封闭蛋白15(CLDN15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 15 (CLDN15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14351 封闭蛋白17(CLDN17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 17 (CLDN17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14352 封闭蛋白20(CLDN20)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 20 (CLDN20) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14353 封闭蛋白22(CLDN22)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 22 (CLDN22) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14354 封闭蛋白6(CLDN6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 6 (CLDN6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14355 肌动蛋白束蛋白3(FSCN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fascin 3 (FSCN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14356 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶5(GALNT5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 5 (GALNT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14357 *过氧化酶7(GPX7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 7 (GPX7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14358 水通道蛋白12B(AQP12B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aquaporin 12B (AQP12B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14359 ATP合酶6(ATP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ATP Synthase 6 (ATP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14360 NADH脱氢酶1(ND1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for NADH Dehydrogenase 1 (ND1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14361 细胞色素b(COB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome b (COB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14362 信号素4B(SEMA4B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Semaphorin 4B (SEMA4B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14363 半*蛋白酶抑制剂9(CST9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cystatin 9 (CST9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14364 外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶5(ENPP5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 5 (ENPP5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14365 *3(PRM3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protamine 3 (PRM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14366 神经肽VF(NPVF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropeptide VF (NPVF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14367 *蛋白酶肽酶抑制因子B支成员11(SERPINB11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serpin Peptidase Inhibitor Clade B Member 11 (SERPINB11) 48T/96T Homo sapiens蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原（vtg)ELISA试剂盒 (Human)
14368 钙黏蛋白24(CDH24)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cadherin 24 (CDH24) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14369 脑啡肽酶2(NEP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neprilysin 2 (NEP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原（vtg)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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