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上海纪宁酶联科技有限公司
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禽脑脊髓炎(AE)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
禽脑脊髓炎(AE)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在禽脑脊髓炎(AE)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
14167 溶血磷脂酰乙醇胺酰基转移酶1(LPEAT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysophosphatidylethanolamine Acyltransferase 1 (LPEAT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14168 溶血磷脂酰肌醇酰基转移酶(LPIAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysophosphatidylinositol Acyltransferase (LPIAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14169 CREB/ATF BZIP转录因子(CREBZF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for CREB/ATF BZIP Transcription Factor (CREBZF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14170 外切酶体成分7(EXOSC7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exosome Component 7 (EXOSC7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14171 外切酶体成分8(EXOSC8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exosome Component 8 (EXOSC8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14172 外切酶体成分9(EXOSC9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exosome Component 9 (EXOSC9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14173 外切酶体成分10(EXOSC10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exosome Component 10 (EXOSC10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14174 外切酶体成分6(EXOSC6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exosome Component 6 (EXOSC6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14175 自噬/苄氯素1调节因子1(AMBRA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Autophagy/Beclin 1 Regulator 1 (AMBRA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14176 水通道蛋白10(AQP10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aquaporin 10 (AQP10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14177 水通道蛋白11(AQP11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aquaporin 11 (AQP11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14178 水通道蛋白12(AQP12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aquaporin 12 (AQP12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14179 Megane蛋白(Mgn)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Megane (Mgn) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14180 TLX1邻位子(TLX1NB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TLX1 Neighbor (TLX1NB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14181 Synleurin蛋白(SLRN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synleurin (SLRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14182 纺锤体蛋白2B(SPIN2B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Spindlin 2B (SPIN2B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14183 釉成熟蛋白(AMTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Amelotin (AMTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14184 葡萄糖苷木糖基转移酶2(GXYLT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucoside Xylosyltransferase 2 (GXYLT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14185 牙骨质蛋白1(CEMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cementum Protein 1 (CEMP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14186 Lebercilin蛋白(LCA5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lebercilin (LCA5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14187 N-乙酰转移酶8B(NAT8B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 8B (NAT8B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14188 甲状旁腺激素2(PTH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone 2 (PTH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14189 G抗原10(GAGE10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for G Antigen 10 (GAGE10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14190 Cytospin A蛋白(CYTSA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytospin A (CYTSA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14191 G抗原13(GAGE13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for G Antigen 13 (GAGE13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14192 端粒酶延长分子2(O2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for omere Maintenance 2 (O2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14193 Juxtanodin蛋白(JN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Juxtanodin (JN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14194 Shootin 1蛋白(Shootin1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Shootin 1 48T/96T Homo sapiens (Human)
14195 蛋白磷酸酶1调节因子亚基18(PPP1R18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Phosphatase 1, Regulatory Subunit 18 (PPP1R18) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14196 环指CCCH-型锌指蛋白域蛋白1(RC3H1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ring Finger And CCCH-Type Zinc Finger Domains Protein 1 (RC3H1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14197 常染色体隐性遗传性耳聋59蛋白(DFNB59)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Deafness, Autosomal Recessive 59 (DFNB59) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14198 含RUN域半*丰富域苄氯素1相互作用蛋白(Rubicon)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for RUN Domain And Cysteine Rich Domain Containing, Beclin 1 Interacting Protein (Rubicon) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14199 Strumpellin蛋白(STRUM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Strumpellin (STRUM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14200 Malectin蛋白(MLEC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Malectin (MLEC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14201 N-乙酰转移酶14(NAT14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 14 (NAT14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14202 TOPBP1相互作用复制刺激蛋白(Treslin)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TOPBP1 Interacting Replication Stimulating Protein (Treslin) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14203 减数分裂抑制因子1(MEI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Meiosis Inhibitor 1 (MEI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14204 Pianissimo蛋白(PIA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pianissimo (PIA) 48T/96T Homo sapiens禽脑脊髓炎(AE)ELISA试剂盒 (Human)
14205 Enkurin蛋白(ENKUR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Enkurin (ENKUR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14206 *磷酸核糖转移酶(UPRT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Uracil Phosphoribosyltransferase (UPRT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5禽脑脊髓炎(AE)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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