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上海纪宁酶联科技有限公司
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鸭γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
鸭γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在鸭γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
14126 信号素6B(SEMA6B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Semaphorin 6B (SEMA6B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14127 信号素6C(SEMA6C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Semaphorin 6C (SEMA6C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14128 NSFL1辅因子(NSFL1C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for NSFL1 Cofactor (NSFL1C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14129 肽酶D(PEPD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peptidase D (PEPD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14130 过氧蛋白同源物(PXDN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxidasin Homolog (PXDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14131 REST辅抑制因子1(RCOR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for REST Corepressor 1 (RCOR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14132 Rififylin蛋白(RFFL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rififylin (RFFL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14133 Synembryn蛋白(SYN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synembryn (SYN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14134 Synembryn B蛋白(SYNB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synembryn B (SYNB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14135 Rab亲和蛋白3A(RPH3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rabphilin 3A (RPH3A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14136 R-脊椎蛋白2(RSPO2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for R-Spondin 2 (RSPO2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14137 Sacsin蛋白(SACS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sacsin (SACS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14138 *组合因子1(SERINC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serine Incorporator 1 (SERINC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14139 特异性蛋白1(Sp1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Specificity Protein 1 (Sp1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14140 Cytospin B蛋白(CYTSB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytospin B (CYTSB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14141 睾素1(TIC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Testican 1 (TIC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14142 睾素2(TIC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Testican 2 (TIC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14143 唾液酸转移酶4C(SIAT4C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 4C (SIAT4C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14144 唾液酸转移酶9(SIAT9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 9 (SIAT9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14145 唾液酸转移酶4B(SIAT4B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 4B (SIAT4B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14146 唾液酸转移酶4A(SIAT4A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 4A (SIAT4A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14147 唾液酸转移酶1(SIAT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 1 (SIAT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14148 唾液酸转移酶7A(SIAT7A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 7A (SIAT7A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14149 唾液酸转移酶8(SIAT8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 8 (SIAT8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14150 唾液酸转移酶8B(SIAT8B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 8B (SIAT8B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14151 唾液酸转移酶8C(SIAT8C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 8C (SIAT8C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14152 唾液酸转移酶8D(SIAT8D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 8D (SIAT8D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14153 唾液酸转移酶7B(SIAT7B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 7B (SIAT7B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14154 唾液酸转移酶7C(SIAT7C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 7C (SIAT7C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14155 唾液酸转移酶7D(SIAT7D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialyltransferase 7D (SIAT7D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14156 正辅因子4(PC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Positive Cofactor 4 (PC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14157 转录衔接因子1(TADA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transcriptional Adaptor 1 (TADA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14158 转录衔接因子3(TADA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transcriptional Adaptor 3 (TADA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14159 *基鸟苷合酶1(TGS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trimethylguanosine Synthase (TGS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14160 Tomoregulin 1蛋白(TR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tomoregulin 1 (TR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14161 Tomoregulin蛋白(TR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tomoregulin (TR) 48T/96T Homo sapiens鸭γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 (Human)
14162 转化因子2β(TRA2β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transformer 2 Beta (TRA2b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14163 tRNA异戊基转移酶1(TRIT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for tRNA Isopentenyltransferase 1 (TRIT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14164 双解丝蛋白1(TWF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Twinfilin 1 (TWF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5鸭γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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