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上海纪宁酶联科技有限公司
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鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
13963 AMPA离子能*受体3(GRIA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, AMPA 3 (GRIA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13964 封闭蛋白3(CLDN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 3 (CLDN3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13965 钠钾氯协同转运蛋白2(NKCC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Na-K-Cl Cotransporter 2 (NKCC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13966 钠氯协同转运蛋白(NCCT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Na-Cl Cotransporter (NCCT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13967 血管紧张素Ⅱ受体1(AGTR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiotensin II Receptor 1 (AGTR1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13968 凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lectin Like Oxidized Low Density Lipoprotein Receptor 1 (LOX1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13969 肌球蛋白重链7(MYH7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 7, Cardiac Muscle, Beta (MYH7) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13970 细胞色素P450家族成员11B1(CYP11B1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome P450 11B1 (CYP11B1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13971 碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅰ(DIO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Deiodinase, Iodothyronine, Type I (DIO1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13972 碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅲ(DIO3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Deiodinase, Iodothyronine, Type III (DIO3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13973 RNA结合基元蛋白20(RBM20)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13974 RNA结合基元蛋白24(RBM24)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for RNA Binding Motif Protein 24 (RBM24) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13975 脊髓灰质炎病毒受体(PVR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Poliovirus Receptor (PVR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13976 RNA结合基元蛋白38(RBM38)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for RNA Binding Motif Protein 38 (RBM38) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13977 基质金属蛋白酶1(MMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 48T/96T Ovis aries; Ovine (Sheep)
13978 甲状腺素受体α(THRα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thyroid Hormone Receptor Alpha (THRa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13979 甲状腺素受体α(THRα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thyroid Hormone Receptor Alpha (THRa) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13980 碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅱ(DIO2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Deiodinase, Iodothyronine, Type II (DIO2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13981 桥粒芯胶粘蛋白2(DSC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Desmocollin 2 (DSC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13982 间隙连接蛋白β1(GJβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gap Junction Protein Beta 1 (GJb1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13983 含V-Set免疫球蛋白域蛋白2(VSIG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for V-Set And Immunoglobulin Domain Containing Protein 2 (VSIG2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13984 SPARC样蛋白1(SPARCL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for SPARC Like Protein 1 (SPARCL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13985 Misato同源物1(MSTO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Misato Homolog 1 (MSTO1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13986 蛋白酶3(PR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proteinase 3 (PR3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13987 轻肽神经丝蛋白(NEFL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurofilament, Light Polypeptide (NEFL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13988 DNA激活蛋白激酶催化亚基肽(PRKDC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase, DNA Activated, Catalytic Polypeptide (PRKDC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13989 酰基羧酸水解酶(AOAH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Acyloxyacyl Hydrolase (AOAH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13990 龙虾肽酶样金属内肽酶(ASTL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Astacin Like Metallo Endopeptidase (ASTL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13991 酪蛋白β(CSN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Casein Beta (CSN2) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13992 半*丰富分泌蛋白3(CRISP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cysteine Rich Secretory Protein 3 (CRISP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13993 2',5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 2',5'-Oligoadenylate Synthetase 2 (OAS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13994 2',5'-寡腺苷酸合成酶3(OAS3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 2',5'-Oligoadenylate Synthetase 3 (OAS3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13995 降钙素原(PCT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Procalcitonin (PCT) 48T/96T Rattus norvegicus鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒 (Rat)
13996 白介素10受体α(IL10Rα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 10 Receptor Alpha (IL10Ra) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13997 死亡关联蛋白激酶1(DAPK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Death Associated Protein Kinase 1 (DAPK1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13998 成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Activation Protein Alpha (FAPa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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