鸭免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在鸭免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
13921 纤维蛋白原γ(FGγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinogen Gamma (FGg) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13922 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 (PCSK9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13923 心型脂肪酸结合蛋白(FABP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle And Heart (FABP3) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
13924 三碘甲状腺原氨酸(T3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Triiodothyronine (T3) 48T/96T General
13925 补体成分4b(C4b)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 4b (C4b) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13926 Rho*核苷酸交换因子7(ARHGEF7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rho Guanine Nucleotide Exchange Factor 7 (ARHGEF7) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13927 冠蛋白1A(CORO1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coronin 1A (CORO1A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13928 *(VD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vitamin D (VD) 48T/96T General
13929 含铜胺氧化酶3(AOC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Amine Oxidase, Copper Containing 3 (AOC3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13930 肽酰*α酰胺化单氧酶(PAM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peptidylglycine Alpha Amidating Monooxygenase (PAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13931 海藻糖酶(TREH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trehalase (TREH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13932 丙酮酸羧化酶(PC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Carboxylase (PC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13933 卵巢滤泡激素(FLCN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Folliculin (FLCN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13934 含Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5(FNDC5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 (FNDC5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13935 Bcl2拮抗/杀伤因子1(BAK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bcl2 Antagonist/Killer 1 (BAK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13936 肝脏磷酸果糖激酶(PFKL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphofructokinase, Liver (PFKL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13937 上皮基质相互作用蛋白1(EPSTI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epithelial Stromal Interaction 1, Breast (EPSTI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13938 葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基(G6PC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucose-6-Phosphatase, Catalytic (G6PC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13939 粘蛋白20(MUC20)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mucin 20 (MUC20) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13940 阿米洛利敏感钠离子通道蛋白1α(SCNN1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Amiloride Sensitive Sodium Channel Subunit Alpha (SCNN1a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13941 核苷酸还原酶M1(RRM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonucleotide Reductase M1 (RRM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13942 *蛋白酶33(PRSS33)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protease, Serine 33 (PRSS33) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13943 肿瘤坏死因子受体超家族成员1A(TNFRSF1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1A (TNFRSF1A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13944 肿瘤坏死因子受体超家族成员1B(TNFRSF1B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1B (TNFRSF1B) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13945 甘氨酰tRNA合成酶(GARS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycyl tRNA Synthetase (GARS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13946 氢/钾离子交换ATP酶β肽(ATP4β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ATPase, H+/K+ Exchanging Beta Polypeptide (ATP4b) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13947 尿卟啉原脱羧酶(UROD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Uroporphyrinogen Decarboxylase (UROD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13948 心肌肌钙蛋白T(TNNT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Troponin T Type 2, Cardiac (TNNT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13949 TATA框结合蛋白关联因子13(TAF13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TATA Box Binding Protein Associated Factor 13 (TAF13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13950 核转录因子Y亚基γ(NFYC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nuclear Transcription Factor Y Gamma (NFYC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13951 细胞程序性死亡蛋白5(PDCD5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 5 (PDCD5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13952 类固醇5α还原酶1(SRD5α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13953 白介素5受体α(IL5Rα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 5 Receptor Alpha (IL5Ra) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13954 Ⅴ型胶原α2(COL5α2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type V Alpha 2 (COL5a2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13955 促肾上腺皮质激素受体(ACTHR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adrenocorticotropic Hormone Receptor (ACTHR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13956 腭/肺/鼻上皮癌关联蛋白(PLUNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Palate/Lung And Nasal Epithelium Associated Protein (PLUNC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13957 无翅型MMTV整合位点家族成员11(WNT11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 11 (WNT11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13958 Notch2氨基端样蛋白(NOTCH2NL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Notch2 N-Terminal Like Protein (NOTCH2NL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13959 伴刀豆球蛋白A(ConA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Concanavalin A (ConA) 48T/96T General
13960 *原片段F1+2(F1+2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prothrombin Fragment 1+2 (F1+2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13961 肾上腺素能受体α2C(ADRα2C)鸭免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adrenergic Receptor Alpha 2C (ADRa2C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13962 低密度脂蛋白受体相关蛋白4(LRP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 4 (LRP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5鸭免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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