小鼠酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA试剂盒科研
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鸭*(cAMP)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
鸭*(cAMP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在鸭*(cAMP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
13881 Bcl2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myeloid Cell Leukemia Sequence 1, Bcl2 Related (MCL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13882 IgG-Fc片段结合蛋白(FcγBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fc Fragment Of IgG Binding Protein (FcgBP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13883 序列相似家族132成员A(FAM132A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 132, Member A (FAM132A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13884 形成素结合蛋白1(FNBP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Formin Binding Protein 1 (FNBP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13885 肌脂蛋白(SLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sarcolipin (SLN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13886 D-多巴色素变位酶(DDT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for D-Dopachrome Tautomerase (DDT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13887 归巢关联细胞黏附分子(HCAM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Homing Associated Cell Adhesion Molecule (HCAM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13888 钙网蛋白(CRT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calreticulin (CRT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13889 钙腔蛋白(CALU)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calumenin (CALU) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13890 成纤维细胞生长因子19(FGF19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 19 (FGF19) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13891 S100钙结合蛋白A8(S100A8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A8 (S100A8) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13892 白介素17F(IL17F)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 17F (IL17F) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13893 ⅩⅢ型胶原(COL13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type XIII (COL13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13894 Ⅶ型胶原(COL7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type VII (COL7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13895 D-多巴色素变位酶(DDT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for D-Dopachrome Tautomerase (DDT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13896 弹性蛋白酶3B(ELA3B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Elastase 3B (ELA3B) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13897 泛素关联蛋白2(UBAP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin Associated Protein 2 (UBAP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13898 尿溶蛋白3A(UPK3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Uroplakin 3A (UPK3A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13899 序列相似家族20成员A(FAM20A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 20, Member A (FAM20A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13900 半胱氨酰白三烯受体1(CYSLTR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cysteinyl Leukotriene Receptor 1 (CYSLTR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13901 弹性蛋白酶(ELA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Elastase 2A (ELA2A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13902 碳分解代谢物阻遏4样蛋白(CCRN4L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carbon Catabolite Repression 4 Like Protein (CCRN4L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13903 巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (MPST) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13904 赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13905 *酶(GLS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutaminase (GLS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13906 磷酸二酯酶4D(PDE4D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific (PDE4D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13907 糖磺基转移酶9(CHST9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carbohydrate Sulfotransferase 9 (CHST9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13908 微管关联蛋白4(MAP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Microtubule Associated Protein 4 (MAP4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13909 双特异性磷酸酶1(DUSP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 1 (DUSP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13910 细胞色素P450家族成员1A2(CYP1A2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome P450 1A2 (CYP1A2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13911 细胞色素P450家族成员3A4(CYP3A4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome P450 3A4 (CYP3A4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13912 δ样蛋白4(δLL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Delta Like Protein 4 (dLL4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13913 T-框蛋白3(TBX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for T-Box Protein 3 (TBX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13914 胃脂酶(LIPF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipase, Gastric (LIPF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13915 粘蛋白2(MUC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mucin 2 (MUC2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13916 纤维蛋白原β(FGβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinogen Beta (FGb) 48T/96T Rattus norvegicus 鸭*(cAMP)ELISA试剂盒(Rat)
13917 非神经元性烯醇化酶(NNE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Enolase, Non Neuronal (NNE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13918 Ⅱ型胶原α1(COL2α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type II Alpha 1 (COL2a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13919 C-Mer原癌基因*激酶(MERTK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C-Mer Proto Oncogene Tyrosine Kinase (MERTK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5鸭*(cAMP)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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