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上海纪宁酶联科技有限公司
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绵羊白介素6(IL-6)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
绵羊白介素6(IL-6)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在绵羊白介素6(IL-6)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
13477 神经肽FF(NPFF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropeptide FF (NPFF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13478 血管紧张素转化酶2(ACE2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13479 孕烷X受体(PXR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pregnane X Receptor (PXR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13480 环氧化合物水解酶4(EPHX4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13481 肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphofructokinase, Muscle (PFKM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13482 肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphofructokinase, Muscle (PFKM) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13483 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 (PCSK9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13484 双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13485 双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13486 围脂滴蛋白1(PLIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Perilipin 1 (PLIN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13487 跨膜*蛋白酶4(TMPRSS4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transmembrane Protease, Serine 4 (TMPRSS4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13488 波形蛋白(VIM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vimentin (VIM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13489 X-框结合蛋白1(XBP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for X-Box Binding Protein 1 (XBP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13490 醛脱氢酶1家族成员A1(ALDH1A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase 1 Family, Member A1 (ALDH1A1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13491 *丰富钙结合蛋白(HRC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histidine Rich Calcium Binding Protein (HRC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13492 MYC关联因子X(MAX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for MYC Associated Factor X (MAX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13493 组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
13494 胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thymidine Phosphorylase (TP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13495 *丰富α2-糖蛋白1(LRG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1 (LRG1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13496 二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dihydropyrimidine Dehydrogenase (DPYD) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13497 解聚蛋白(DSTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Destrin (DSTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13498 *S转移酶ω1(GSTω1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Omega 1 (GSTo1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13499 血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 5 (ADAMTS5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13500 组织蛋白酶Z(CTSZ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin Z (CTSZ) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13501 真核翻译起始因子6(EIF6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Eukaryotic Translation Initiation Factor 6 (EIF6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13502 核糖核酸酶Ⅲ(RNASEN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease III, Nuclear (RNASEN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13503 乙酰*酯酶关联蛋白(ACHAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Acetylcholinesterase Associated Protein (ACHAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13504 活性依赖性神经保护因子(ADNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Activity Dependent Neuroprotector Protein (ADNP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13505 脑富含膜附着信号蛋白1(BASP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Brain Abundant, Membrane Attached Signal Protein 1 (BASP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13506 小泛素相关修饰蛋白2(SUMO2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Small Ubiquitin Related Modifier Protein 2 (SUMO2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13507 Adropin蛋白(AD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adropin (AD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13508 蛋白酶激活受体4(PAR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protease Activated Receptor 4 (PAR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13509 聚集蛋白聚糖(AGC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aggrecan (AGC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13510 成纤维细胞生长因子受体样蛋白1(FGFRL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor Like Protein 1 (FGFRL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13511 整合素α5(ITGα5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Alpha 5 (ITGa5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13512 防御素α6(DEFα6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Alpha 6, Paneth Cell Specific (DEFa6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13513 纤维蛋白肽B(FPB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinopeptide B (FPB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13514 Runt相关转录因子2(RUNX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Runt Related Transcription Factor 2 (RUNX2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13515 *7(KLK7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kallikrein 7 (KLK7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13516 70kDa热休克蛋白5(HSPA5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 5 (HSPA5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13517 受体活性修饰蛋白2(RAMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Receptor Activity Modifying Protein 2 (RAMP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13518 B类清道夫受体1(SCARB1)绵羊白介素6(IL-6)ELISA试剂盒检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Scavenger Receptor Class B Member 1 (SCARB1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5绵羊白介素6(IL-6)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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