绵羊主要组织相容性复合体（MHC）ELISA试剂盒

绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

13435 组蛋白脱乙酰基酶6(HDAC6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 6 (HDAC6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13436 Bcl2关联永生基因3(BAG3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bcl2 Associated Athanogene 3 (BAG3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13437 胰岛素降解酶(IDE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Degrading Enzyme (IDE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13438 ⅩⅤ型胶原(COL15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type XV (COL15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13439 丝织蛋白1(DBN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Drebrin 1 (DBN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13440 墨蝶呤还原酶(SPR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sepiapterin Reductase (SPR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13441 序列相似家族135成员B(FAM135B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 135, Member B (FAM135B) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13442 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13443 分泌粒蛋白Ⅴ(SCG5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secretogranin V (SCG5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13444 烟碱型*受体α5(CHRNα5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Alpha 5 (CHRNa5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13445 生长分化因子2(GDF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 2 (GDF2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13446 含卷曲螺旋C2域蛋白1A(CC2D1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coiled Coil And C2 Domain Containing Protein 1A (CC2D1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13447 锌结合α2-糖蛋白1(αZGP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-2-Glycoprotein 1, Zinc Binding (aZGP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13448 斯钙素1(STC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stanniocalcin 1 (STC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13449 丝蛋白结合LIM蛋白1(FBLIM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Filamin Binding LIM Protein 1 (FBLIM1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13450 L-型电压依赖性钙离子通道α1D亚基(CACNα1D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1D Subunit (CACNa1D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13451 白介素1β(IL1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13452 神经纤维素2(NF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurofibromin 2 (NF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13453 母系蛋白2(MATN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrilin 2 (MATN2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13454 皮质酮(CORT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Corticosterone (CORT) 48T/96T General
13455 抗利尿激素(ADH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13456 酪胺酸酶(TYR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tyrosinase (TYR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13457 组织蛋白酶G(CTSG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin G (CTSG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13458 肝细胞生长因子受体(HGFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor Receptor (HGFR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13459 二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dihydroorotate Dehydrogenase (DHODH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13460 *加压素原(VP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Preprovasopressin (VP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13461 白介素5受体α(IL5Rα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 5 Receptor Alpha (IL5Ra) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13462 应激诱导磷蛋白1(STIP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stress Induced Phosphoprotein 1 (STIP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13463 硬脂酰*去饱和酶(SCD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stearoyl Coenzyme A Desaturase (SCD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13464 成纤维细胞生长因子21(FGF21)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
13465 补体成分4d(C4d)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 4d (C4d) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13466 *6(KLK6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kallikrein 6 (KLK6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13467 嗜铬蛋白B(CHGB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chromogranin B (CHGB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13468 胰岛素样生长因子酸不稳定亚基(IGFALS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein, Acid Labile Subunit (IGFALS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13469 血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiotensin II (AngII) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13470 双特异性磷酸酶6(DUSP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 6 (DUSP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13471 Nodal同源物(NODAL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nodal Homolog (NODAL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13472 Nei内切核酸酶Ⅷ样蛋白1(NEIL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nei Endonuclease VIII Like Protein 1 (NEIL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13473 黑素瘤细胞黏附分子(MCAM)绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Melanoma Cell Adhesion Molecule (MCAM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13474 转化生长因子β3(TGFβ3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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