绵羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在绵羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
13356 FlightlessⅠ同源物(FLIⅠ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Flightless I Homolog (FLII) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13357 Thy1细胞表面抗原(Thy1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thy1 Cell Surface Antigen (Thy1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13358 吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13359 沉默调节蛋白1(SIRT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sirtuin 1 (SIRT1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13360 肥大细胞类*1(CMA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chymase 1, Mast Cell (CMA1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13361 促泌素(SCGN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secretagogin (SCGN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13362 多巴脱羧酶(DDC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dopa Decarboxylase (DDC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13363 干扰素α4(IFNα4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Alpha 4 (IFNa4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13364 热休克蛋白β8(HSPβ8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 8 (HSPb8) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13365 运动神经元生存蛋白2(SMN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Survival Of Motor Neuron 2, Centromeric (SMN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13366 γ-谷氨酰基转氨酶5(γGT5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gamma-Glutamyltransferase 5 (gGT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13367 谷氧还蛋白(GLRX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutaredoxin (GLRX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13368 解整合素金属蛋白酶19(ADAM19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 19 (ADAM19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13369 白细胞免疫球蛋白样受体亚家族A成员3(LILRA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leukocyte Immunoglobulin Like Receptor Subfamily A, Member 3 (LILRA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13370 胰岛素样蛋白3(INSL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Protein 3 (INSL3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13371 钙结合蛋白(CALB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calbindin (CALB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13372 联会复合体蛋白3(SYCP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synaptonemal Complex Protein 3 (SYCP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13373 结肠癌转移关联基因1(MACC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Metastasis Associated In Colon Cancer 1 (MACC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13374 趋化因子C-C-基元受体7(CCR7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 7 (CCR7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13375 整合素α3(ITGα3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Alpha 3 (ITGa3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13376 外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(ENPP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 1 (ENPP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13377 复合素2(CPLX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complexin 2 (CPLX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13378 组蛋白脱乙酰基酶2(HDAC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 2 (HDAC2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13379 自噬相关16样蛋白1(ATG16L1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Autophagy Related Protein 16 Like Protein 1 (ATG16L1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13380 腺苷酸环化酶关联蛋白2(CAP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adenylyl Cyclase Associated Protein 2 (CAP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13381 Rac-GTP酶激活蛋白1(RACGAP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rac-GTPase Activating Protein 1 (RACGAP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13382 BTG3关联核蛋白(BANP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for BTG3 Associated Nuclear Protein (BANP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13383 重肽铁蛋白(FTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferritin, Heavy Polypeptide (FTH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13384 生长关联蛋白43(GAP43)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Associated Protein 43 (GAP43) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13385 乙二醛酶Ⅰ(GLO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glyoxalase I (GLO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13386 衰老关键蛋白2(FBLN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibulin 2 (FBLN2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13387 外周蛋白(PRPH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peripherin (PRPH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13388 芳烃受体抑制因子(AHRR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor Repressor (AHRR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13389 Slit同源物1(Slit1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Slit Homolog 1 (Slit1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13390 SRC/FGR/YES相关FYN癌基因(FYN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for FYN Oncogene Related To SRC/FGR/YES (FYN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13391 磷酸肌醇-3-激酶催化亚基β肽(PIK3Cβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Beta Polypeptide (PIK3Cb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13392 血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiotensin II (AngII) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
13393 转甲状腺素蛋白(TTR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transthyretin (TTR) 48T/96T Mus musculus绵羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒 (Mouse)
13394 甲状旁腺激素(PTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone (PTH) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
13395 垂体肿瘤转化1相互作用蛋白(PTTG1IP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pituitary Tumor Transforming 1 Interacting Protein (PTTG1IP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5绵羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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