猴胰岛素(INS)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在猴胰岛素(INS)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
13275 丁酰*酯酶(BCHE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Butyrylcholinesterase (BCHE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13276 突触融合蛋白2(STX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 2 (STX2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13277 突触融合蛋白1A(STX1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntaxin 1A, Brain (STX1A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13278 *半*连接酶催化亚基(GCLC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamate Cysteine Ligase, Catalytic (GCLC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13279 Bcl2样蛋白11(BCL2L11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bcl2 Like Protein 11 (BCL2L11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13280 基质金属蛋白酶25(MMP25)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 25 (MMP25) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13281 Ⅵ型胶原α3(COL6α3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type VI Alpha 3 (COL6a3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13282 转化受体电位阳离子通道亚家族M成员1(TRPM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 1 (TRPM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13283 成纤维细胞生长因子18(FGF18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 18 (FGF18) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13284 弹性蛋白酶3B(ELA3B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Elastase 3B (ELA3B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13285 TNF受体关联因子6(TRAF6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TNF Receptor Associated Factor 6 (TRAF6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13286 旁血小板溶蛋白(PPL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Periplakin (PPL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13287 淋巴细胞抗原96(LY96)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lymphocyte Antigen 96 (LY96) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13288 Diaphanous同源物1(DIAPH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Diaphanous Homolog 1 (DIAPH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13289 解整合素金属蛋白酶22(ADAM22)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 22 (ADAM22) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13290 电子转移黄素蛋白α肽(ETFα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Electron Transfer Flavoprotein Alpha Polypeptide (ETFa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13291 精氨基琥珀酸合成酶1(ASS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Argininosuccinate Synthetase 1 (ASS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13292 蛋白二硫化物异构酶A6(PDIA6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A6 (PDIA6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13293 半*蛋白酶抑制剂6(CST6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cystatin 6 (CST6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13294 促泌素(SCGN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secretagogin (SCGN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13295 促泌素(SCGN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secretagogin (SCGN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13296 赖氨酰氧化酶样蛋白4(LOXL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 4 (LOXL4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13297 内皮细胞特异分子1(ESM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelial Cell Specific Molecule 1 (ESM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13298 金属硫蛋白1E(MT1E)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Metallothionein 1E (MT1E) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13299 *Ⅵ(F6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor VI (F6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13300 无翅型MMTV整合位点家族成员4(WNT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4 (WNT4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13301 USP6氨基端样蛋白(USP6NL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for USP6 N-Terminal Like Protein (USP6NL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13302 血幼素(HJV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemojuvelin (HJV) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13303 盐皮质激素受体(MR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mineralocorticoid Receptor (MR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13304 AMPA离子能*受体1(GRIA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, AMPA 1 (GRIA1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13305 N-甲基-D-天氡氨酸离子能*受体1(GRIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 1 (GRIN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13306 杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bactericidal/Permeability Increasing Protein (BPI) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13307 骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Actin Alpha 1, Skeletal Muscle (ACTa1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13308 骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Troponin T Type 1, Slow Skeletal (TNNT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13309 细胞色素P450家族成员1B1(CYP1B1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome P450 1B1 (CYP1B1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13310 肌球蛋白重链6(MYH6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 6, Cardiac Muscle, Alpha (MYH6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13311 丝裂原激活蛋白激酶激酶1(MAP2K1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1 (MAP2K1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13312 血小板反应蛋白2(THBS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thrombospondin 2 (THBS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13313 肝配蛋白A受体10(EPHA10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ephrin Type A Receptor 10 (EPHA10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13314 转化受体电位阳离子通道亚家族M成员6(TRPM6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 6 (TRPM6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13315 转化受体电位阳离子通道亚家族M成员7(TRPM7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 7 (TRPM7) 48T/96T Rattus norvegicus猴胰岛素(INS)ELISA试剂盒 (Rat)
13316 转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 1 (TRPV1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5猴胰岛素(INS)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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