猴透明质酸（HA）ELISA试剂盒

猴透明质酸(HA)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在猴透明质酸(HA)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

12990 自身免疫调节因子(AIRE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Autoimmune Regulator (AIRE) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12991 心肌肌钙蛋白T(TNNT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Troponin T Type 2, Cardiac (TNNT2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12992 绒毛膜*α肽(CGα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide (CGa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12993 刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hedgehog Interacting Protein (HHIP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12994 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D1(GPLD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1 (GPLD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12995 免疫球蛋白A1(IgA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin A1 (IgA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12996 免疫球蛋白A2(IgA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin A2 (IgA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12997 D-氨基酸氧化酶激活因子(DAOA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for D-amino Acid Oxidase Activator (DAOA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12998 无翅型MMTV整合位点家族成员5A(WNT5A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5A (WNT5A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12999 Discs大同源物4(DLG4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Discs, Large Homolog 4 (DLG4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13000 神经调节素4(NRG4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuregulin 4 (NRG4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13001 *氨基甲酰转移酶(OCT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ornithine Carbamoyl Transferase (OCT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13002 神经调节素3(NRG3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuregulin 3 (NRG3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13003 无翅型MMTV整合位点家族成员5A(WNT5A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5A (WNT5A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13004 Ⅰ型胶原α1(COL1α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 1 (COL1a1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13005 甘露糖受体C1(MRC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mannose Receptor C Type 1 (MRC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13006 甘露糖受体C1(MRC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mannose Receptor C Type 1 (MRC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13007 胰岛素样蛋白3(INSL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Protein 3 (INSL3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13008 线粒体转录因子A(TFAM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transcription Factor A, Mitochondrial (TFAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13009 CD19分子(CD19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 19 (CD19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13010 唾液酸结合Ig样凝集素2(SIGLEC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 2 (SIGLEC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13011 胰高血糖素(GC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucagon (GC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13012 B-细胞激活因子(BAFF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for B-Cell Activating Factor (BAFF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13013 载脂蛋白A4(APOA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apolipoprotein A4 (APOA4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13014 封闭蛋白3(CLDN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 3 (CLDN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13015 磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glypican 1 (GPC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13016 果糖二磷酸醛缩酶C(ALDOC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aldolase C, Fructose Bisphosphate (ALDOC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13017 双特异性磷酸酶5(DUSP5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 5 (DUSP5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13018 高迁移率族AT Hook蛋白1(HMGA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for High Mobility Group AT Hook Protein 1 (HMGA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13019 高迁移率族AT Hook蛋白2(HMGA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for High Mobility Group AT Hook Protein 2 (HMGA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13020 己糖激酶2(HK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hexokinase 2 (HK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13021 蛋白*磷酸酶ⅣA3(PTPⅣA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase Type IVA 3 (PTP4A3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13022 CREB调节转录辅激活因子3(CRTC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for CREB Regulated Transcription Coactivator 3 (CRTC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13023 环指蛋白39(RNF39)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ring Finger Protein 39 (RNF39) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13024 组胺H4受体(HRH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histamine Receptor H4 (HRH4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13025 组胺H4受体(HRH4)检测试剂盒猴透明质酸(HA)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histamine Receptor H4 (HRH4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13026 含锌飘带域蛋白1(ZNRD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Zinc Ribbon Domain Containing Protein 1 (ZNRD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5猴透明质酸(HA)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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