猴Ⅲ型前胶原肽（PⅢNP）ELISA试剂盒

猴Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在猴Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

12953 嗜酸性粒细胞过氧化物酶(EPX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Eosinophil Peroxidase (EPX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12954 蛋白聚糖4(PRG4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proteoglycan 4 (PRG4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12955 X-连锁凋亡蛋白抑制因子(XIAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for X-Linked Inhibitor Of Apoptosis Protein (XIAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12956 血小板衍生生长因子C(PDGFC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor C (PDGFC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12957 泛素特异性肽酶8(USP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin Specific Peptidase 8 (USP8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12958 醌NADH脱氢酶1(NQO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12959 醌NADH脱氢酶1(NQO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12960 和肽素(CPP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Copeptin (CPP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12961 白介素1β(IL1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
12962 载脂蛋白L1(APOL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apolipoprotein L (APOL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12963 四旋蛋白30(TSPAN30)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tetraspanin 30 (TSPAN30) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12964 粘蛋白13(MUC13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mucin 13, Cell Surface Associated (MUC13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12965 RAD54样蛋白2(RAD54L2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for RAD54 Like Protein 2 (RAD54L2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12966 S100钙结合蛋白A4(S100A4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A4 (S100A4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12967 亨廷顿蛋白(HTT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Huntingtin (HTT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12968 染色质域解旋酶DNA结合蛋白4(CHD4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 4 (CHD4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12969 R-脊椎蛋白1(RSPO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for R-Spondin 1 (RSPO1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12970 肌营养不良蛋白关联糖蛋白1(DAG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dystrophin Associated Glycoprotein 1 (DAG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12971 双糖链蛋白聚糖(BGN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Biglycan (BGN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12972 组织蛋白酶D(CTSD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin D (CTSD) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12973 组织蛋白酶D(CTSD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin D (CTSD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12974 间皮素(MSLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mesothelin (MSLN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12975 突触极蛋白2(SYNPO2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Synaptopodin 2 (SYNPO2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12976 角膜蛋白(KERA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratocan (KERA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12977 正五聚蛋白3(PTX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pentraxin 3, Long (PTX3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12978 中间α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H5 (ITIH5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12979 中间α-球蛋白抑制因子H2(ITIH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H2 (ITIH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12980 中间α-球蛋白抑制因子H1(ITIH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H1 (ITIH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12981 CD72分子(CD72)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 72 (CD72) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12982 血浆*过氧化物酶(GPX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 3, Plasma (GPX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12983 神经软骨蛋白(NCDN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurochondrin (NCDN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12984 前蛋白转化酶枯草溶菌素5(PCSK5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 5 (PCSK5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12985 血清淀粉样P物质(SAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serum Amyloid P Component (SAP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12986 粒细胞趋化蛋白2(GCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Granulocyte Chemotactic Protein 2 (GCP2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12987 胃动蛋白2(GKN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gastrokine 2 (GKN2) 48T/96T Rattus norvegicus 猴Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒(Rat)
12988 血管生成素样蛋白7(ANGPTL7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 7 (ANGPTL7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5猴Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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