骆驼转化生长因子β2（TGFβ2）ELISA试剂盒

骆驼转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在骆驼转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

12796 水通道蛋白8(AQP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aquaporin 8 (AQP8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12797 双特异性磷酸酶9(DUSP9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 9 (DUSP9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12798 神经源性分化蛋白6(NEUROD6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurogenic Differentiation 6 (NEUROD6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12799 血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plaet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12800 血小板反应蛋白2(THBS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thrombospondin 2 (THBS2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12801 碳酸酐酶Ⅸ(CA9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carbonic Anhydrase IX (CA9) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12802 白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Accessory Protein (IL1RAP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12803 磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDPK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphoinositide Dependent Protein Kinase 1 (PDPK1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12804 精胺氧化酶(SMOX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Spermine Oxidase (SMOX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12805 HtrA*肽酶4(HTRA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for HtrA Serine Peptidase 4 (HTRA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12806 阻抑素(PHB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prohibitin (PHB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12807 果糖二磷酸醛缩酶A(ALDOA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aldolase A, Fructose Bisphosphate (ALDOA) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12808 Ⅵ型胶原α1(COL6α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type VI Alpha 1 (COL6a1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12809 果糖二磷酸醛缩酶B(ALDOB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aldolase B, Fructose Bisphosphate (ALDOB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12810 果糖二磷酸醛缩酶C(ALDOC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aldolase C, Fructose Bisphosphate (ALDOC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12811 *合成酶(GS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamine synthetase (GS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12812 肝配蛋白B2(EFNB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ephrin B2 (EFNB2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12813 溶质载体家族30成员8(SLC30A8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 30 Member 8 (SLC30A8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12814 半*丰富蛋白1(CRIP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cysteine Rich Protein 1, Intestinal (CRIP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12815 *合成酶(GS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamine synthetase (GS) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12816 CD83分子(CD83)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 83 (CD83) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12817 激素敏感性脂肪酶(LIPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipase, Hormone Sensitive (LIPE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12818 信号素7A(SEMA7A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Semaphorin 7A (SEMA7A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12819 亚铁螯合酶(FECH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferrochelatase (FECH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12820 N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12821 ⅣD组磷脂酶A2(PLA2G4D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12822 补体成分5a(C5a)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 5a (C5a) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12823 YY肽(PYY)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peptide YY (PYY) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12824 线粒体超氧化物歧化酶(SOD2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12825 中性鞘磷脂酶(NSMASE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neutral Sphingomyelinase (NSMASE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12826 沉默调节蛋白1(SIRT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sirtuin 1 (SIRT1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12827 沉默调节蛋白3(SIRT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sirtuin 3 (SIRT3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12828 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PPARγC1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma Coactivator 1 Alpha (PPARgC1a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12829 脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease I (DNASE1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12830 *乙酰转移酶(ChAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Choline Acetyltransferase (ChAT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12831 Ⅻ型胶原(COL12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type XII (COL12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12832 低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 6 (LRP6) 48T/96T Homo sapiens骆驼转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 (Human)
12833 尿调蛋白(UMOD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Uromodulin (UMOD) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5骆驼转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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