骆驼内皮素1（ET-1）ELISA试剂盒

骆驼内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在骆驼内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

12754 前列腺蛋白类脂肪酶B(LIPB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipophilin B, Prostatein Like (LIPB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12755 β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1(βACE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12756 早老素1(PSEN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Presenilin 1 (PSEN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12757 血管非炎性蛋白1(VNN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vanin 1 (VNN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12758 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha (CAMK2a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12759 拓扑异构酶Ⅱβ(TOP2β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Topoisomerase II Beta (TOP2b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12760 再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma (REG3g) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12761 异连蛋白β(DTNβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dystrobrevin Beta (DTNb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12762 脊椎蛋白1(SPON1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Spondin 1 (SPON1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12763 互联蛋白神经元中间丝蛋白α(INα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Internexin Neuronal Intermediate Filament Protein Alpha (INa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12764 Lin-28同源物A(LIN28A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lin-28 Homolog A (LIN28A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12765 组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12766 受磷蛋白(PLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholamban (PLN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12767 无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12768 再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma (REG3g) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12769 兰尼定受体1(RYR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ryanodine Receptor 1, Skeletal (RYR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12770 核因子I/B(NFIB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nuclear Factor I/B (NFIB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12771 R-脊椎蛋白1(RSPO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for R-Spondin 1 (RSPO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12772 神经颗粒素(NRGN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurogranin (NRGN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12773 桥粒联结蛋白(AHNAK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Desmoyokin (AHNAK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12774 肌钙蛋白T(TNT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Troponin T (TNT) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12775 分泌跨膜蛋白1(SECTM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secreted And Transmembrane Protein 1 (SECTM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12776 肥大细胞类*1(CMA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chymase 1, Mast Cell (CMA1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12777 无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12778 无翅型MMTV整合位点家族成员2(WNT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2 (WNT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12779 无翅型MMTV整合位点家族成员1(WNT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 1 (WNT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12780 序列相似家族5成员C(FAM5C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 5, Member C (FAM5C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12781 白三烯A4水解酶(LTA4H)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leukotriene A4 Hydrolase (LTA4H) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12782 芳香烃受体核转位因子样蛋白(ARNTL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator Like Protein (ARNTL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12783 核受体亚家族1D组成员2(NR1D2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nuclear Receptor Subfamily 1, Group D, Member 2 (NR1D2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12784 粘蛋白4(MUC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mucin 4 (MUC4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12785 *结合球蛋白(CBG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Corticosteroid Binding Globulin (CBG) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12786 防御素α1(DEFα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Alpha 1, Neutrophil (DEFa1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12787 四旋蛋白30(TSPAN30)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tetraspanin 30 (TSPAN30) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12788 细胞色素P450家族成员1A1(CYP1A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome P450 1A1 (CYP1A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12789 雌激素受体相关受体α(ERRα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Estrogen Related Receptor Alpha (ERRa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12790 极低密度脂蛋白受体(VLDLR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Very Low Density Lipoprotein Receptor (VLDLR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12791 淀粉样前体蛋白(APP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Amyloid Precursor Protein (APP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12792 E1A结合蛋白P300(EP300)检测试剂盒骆驼内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for E1A Binding Protein P300 (EP300) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12793 周期素依赖性激酶抑制因子1A(CDKN1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1A (CDKN1A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5骆驼内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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